Способ гистологической окраски артерий сердца

Одной из проблем при проведении исследований, посвященных изучению соединительной ткани, является одновременное выявление эластических и коллагеновых волокон на одном препарате для определения их пространственных взаимоотношений и относительной удельной плотности. Цель исследования – оценить возможность дифференцированного окрашивания эластических и коллагеновых волокон растворами резорцин-фуксина и прочного зеленого FCF на одном препарате и сравнить информативность предлагаемого способа с информативностью классических способов окраски соединительной ткани, выполненных по стандартным протоколам. Материал и методы. Материалом служили препараты сердца людей, умерших от причин, не связанных с болезнями сердца. Для изготовления гистологических препаратов брали участок передней межжелудочковой артерии с подлежащим миокардом. После формалиновой фиксации материала, стандартной проводки и заливки в парафин изготавливали гистологические срезы. Препараты депарафинизировали, погружали в резорцин-фуксин на 15 минут, затем окрашивали железным гематоксилином Вейгерта 2 минуты, далее наносили на поверхность среза на 2 минуты 0,1%-й раствор прочного зеленого FCF, смешанный с насыщенным раствором пикриновой кислоты в соотношении 1:10 непосредственно перед окраской, препараты дегидратировали, просветляли и заключали в синтетическую монтирующую среду. Результаты. На полученных препаратах эластические волокна были окрашены в темно-синий цвет, а коллагеновые волокна – в оттенки зеленого, что позволяло дифференцировать их на основании различий окраски. Заключение. Разработан и апробирован способ окраски, который обеспечивает возможность одновременного выявления на одном препарате эластических и коллагеновых волокон при последовательном окрашивании растворами резорцин-фуксина и прочного зеленого FCF.

1. Никель В.В., Касимцев А.А., Ефремова В.П. Паравазальная соединительная ткань внутристеночных кровеносных сосудов сердца в возрастном аспекте. Успехи геронтол. 2012;25(4):612–616.

2. Bancroft J.D., Suvarna S.K., Layton C. Bancroft’s theory and practice of histological techniques. 7th ed. Oxford: Elsevier Churchill Livingstone; 2013. 604 p.

3. Suvik A., Effendy A.W.M. The use of modified Masson’s trichrome staining in collagen evaluation in wound healing study. Mal. J. Vet. Res. 2012;3(1):39–47.

4. Розенберг В.Д., Непомнящих Л.М. Патоморфологические проявления аритмогенного сердца. Бюл. эксперим. биол. и мед. 2003;136(7):106–110.

5. Ромейс Б. Микроскопическая техника. М.: Изд-во иностр. лит., 1954. 719 с.

6. Fast Green FCF. Available at: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Fast-Green-FCF

7. Sarasquete C., Gutiérrez M. New tetrachromic VOF stain (Type III-GS) for normal and pathological fish tissues. Eur. J. Histochem. 2005;49(2):105–114. doi: 10.4081/945

8. Segnani C., Ippolito C., Antonioli L., Pellegrini C., Blandizz C., Dolf A., Bernardini N. Histochemical detection of collagen fibers by sirius red/ fast green is more sensitive than van gieson or sirius red alone in normal and inflamed rat colon. PloS One. 2015;10(12):e0144630. doi: 10.1371/journal.pone.0144630

9. Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники. Л.: Медицина, 1969. 423 с.