sibmedСибирский научный медицинский журналСибирский научный медицинский журнал2410-25122410-2520ИЦиГ СО РАН10.18699/SSMJ20220305sibmed-803Research ArticleМЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИBIOMEDICINEСпособ гистологической окраски артерий сердцаStaining method for coronary arterieshttps://orcid.org/0000-0002-2973-3481ДмитриеваЕ. Г.DmitrievaE. G.

Евгения Германовна Дмитриева

620028, г. Екатеринбург, ул. Репина, 3

620002, г. Екатеринбург, ул. Мира, 19

Evgenia G. Dmitrieva

620028, Yekaterinburg, Repin str., 3

620002, Yekaterinburg, Mira str., 19

anmayak@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-5921-6680ХацкоС. Л.KhatskoS. L.

Сергей Леонидович Хацко

620002, г. Екатеринбург, ул. Мира, 19

Sergey L. Khatsko

620002, Yekaterinburg, Mira str., 19

hardscore@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8267-2895ЯкимовА. А.YakimovA. A.

Андрей Аркадьевич Якимов, к.м.н.

620028, г. Екатеринбург, ул. Репина, 3

620002, г. Екатеринбург, ул. Мира, 19

Andrei A. Yakimov, candidate of medical sciences

620028, Yekaterinburg, Repin str., 3

620002, Yekaterinburg, Mira str., 19

ayakimov07@mail.ruУральский государственный медицинский университет Минздрава России; Уральский федеральный университет им. первого Президента России Б.Н. ЕльцинаРоссияUral State Medical University of Minzdrav of Russia; Ural Federal University n.a. the First President of Russia B.N. YeltsinRussian FederationУральский федеральный университет им. первого Президента России Б.Н. ЕльцинаРоссияUral Federal University n.a. the First President of Russia B.N. YeltsinRussian Federation20222706202242347–51Copyright © Дмитриева Е.Г., Хацко С.Л., Якимов А.А., 20222022Дмитриева Е.Г., Хацко С.Л., Якимов А.А.Dmitrieva E.G., Khatsko S.L., Yakimov A.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://sibmed.elpub.ru/jour/article/view/803

Одной из проблем при проведении исследований, посвященных изучению соединительной ткани, является одновременное выявление эластических и коллагеновых волокон на одном препарате для определения их пространственных взаимоотношений и относительной удельной плотности. Цель исследования – оценить возможность дифференцированного окрашивания эластических и коллагеновых волокон растворами резорцин-фуксина и прочного зеленого FCF на одном препарате и сравнить информативность предлагаемого способа с информативностью классических способов окраски соединительной ткани, выполненных по стандартным протоколам. Материал и методы. Материалом служили препараты сердца людей, умерших от причин, не связанных с болезнями сердца. Для изготовления гистологических препаратов брали участок передней межжелудочковой артерии с подлежащим миокардом. После формалиновой фиксации материала, стандартной проводки и заливки в парафин изготавливали гистологические срезы. Препараты депарафинизировали, погружали в резорцин-фуксин на 15 минут, затем окрашивали железным гематоксилином Вейгерта 2 минуты, далее наносили на поверхность среза на 2 минуты 0,1%-й раствор прочного зеленого FCF, смешанный с насыщенным раствором пикриновой кислоты в соотношении 1:10 непосредственно перед окраской, препараты дегидратировали, просветляли и заключали в синтетическую монтирующую среду. Результаты. На полученных препаратах эластические волокна были окрашены в темно-синий цвет, а коллагеновые волокна – в оттенки зеленого, что позволяло дифференцировать их на основании различий окраски. Заключение. Разработан и апробирован способ окраски, который обеспечивает возможность одновременного выявления на одном препарате эластических и коллагеновых волокон при последовательном окрашивании растворами резорцин-фуксина и прочного зеленого FCF.

Detection of elastic and collagen fibers in the same histological section to determine their relationships and quantification is important for connective tissue investigations. The aim of the study was to assess the possibility of differentiated staining of elastic and collagen fibers with resorcin-fuchsin and fast green FCF in the same histological section and compare the result of this method with the results of the classical methods of staining connective tissue, performed according to standard protocols. Material and methods. We studied adult human hearts, obtained from patients who died from non-cardiac causes. We cut tissue sections from the anterior interventricular artery and the underlying myocardium. After formalin fixation, standard processing and embedding in paraffin of the material, histological sections were made. Histological sections were deparaffinized and immersed resorcin-fuchsin for 15 minutes, then stained with Weigert’s iron hematoxylin for 2 minutes, then for 2 minutes were applied to the preparation surface 0.1% solution of fast green FCF mixed with a saturated solution of picric acid immediately before staining in a ratio of 1:10, the histological sections were dehydrated, cleared and mounted in permanent mounting medium. Results. Elastic fibers were dyed in dark blue, and collagen fibers in different shades of green, which made it possible to differentiate them on the basis of color differences in one histological section. Conclusion. We have developed and tested the method of staining, which provides the possibility of simultaneous detection of elastic and collagen fibers with successive staining with solutions of resorcin-fuchsin and fast green FCF on one histological section.

коллагенэластические волокнаартериисердцегистохимия.collagenelastic fibersarteryhearthistochemistryReferencesНикель В.В., Касимцев А.А., Ефремова В.П. Паравазальная соединительная ткань внутристеночных кровеносных сосудов сердца в возрастном аспекте. Успехи геронтол. 2012;25(4):612–616.Nikel V.V., Kasimtsev A.A., Efremova V.P. Age-related features of paravasal connective tissue of intraparietal blood vessels of the heart. Uspekhi gerontologii = Advances in Gerontology. 2013;3(3):201–204. [In Russian]. doi: 10.1134/S2079057013030089Bancroft J.D., Suvarna S.K., Layton C. Bancroft’s theory and practice of histological techniques. 7th ed. Oxford: Elsevier Churchill Livingstone; 2013. 604 p.Bancroft J.D., Suvarna S.K., Layton C. Bancroft’s theory and practice of histological techniques. 7th ed. Oxford: Elsevier Churchill Livingstone; 2013. 604 p.Suvik A., Effendy A.W.M. The use of modified Masson’s trichrome staining in collagen evaluation in wound healing study. Mal. J. Vet. Res. 2012;3(1):39–47.Suvik A., Effendy A.W.M. The use of modified Masson’s trichrome staining in collagen evaluation in wound healing study. Mal. J. Vet. Res. 2012;3(1):39–47.Розенберг В.Д., Непомнящих Л.М. Патоморфологические проявления аритмогенного сердца. Бюл. эксперим. биол. и мед. 2003;136(7):106–110.Rozenberg V.D., Nepomnyashchikh L.M. Pathomorphological criteria of arrhythmogenic heart. Byulleten’ eksperimental’noy biologii i meditsiny = Bulletin of Experimental Biology and Medicine (Bull. Exp. Biol. Med.). 2003;136(7):93–96. [In Russian]. doi: 10.1023/a:1026061501921Ромейс Б. Микроскопическая техника. М.: Изд-во иностр. лит., 1954. 719 с.Romeys B. Microscopic technique. Moscow: Foreign Literature, 1954. 719 p. [In Russian].Fast Green FCF. Available at: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Fast-Green-FCFFast Green FCF. Available at: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Fast-Green-FCFSarasquete C., Gutiérrez M. New tetrachromic VOF stain (Type III-GS) for normal and pathological fish tissues. Eur. J. Histochem. 2005;49(2):105–114. doi: 10.4081/945Sarasquete C., Gutiérrez M. New tetrachromic VOF stain (Type III-GS) for normal and pathological fish tissues. Eur. J. Histochem. 2005;49(2):105–114. doi: 10.4081/945Segnani C., Ippolito C., Antonioli L., Pellegrini C., Blandizz C., Dolf A., Bernardini N. Histochemical detection of collagen fibers by sirius red/ fast green is more sensitive than van gieson or sirius red alone in normal and inflamed rat colon. PloS One. 2015;10(12):e0144630. doi: 10.1371/journal.pone.0144630Segnani C., Ippolito C., Antonioli L., Pellegrini C., Blandizz C., Dolf A., Bernardini N. Histochemical detection of collagen fibers by sirius red/ fast green is more sensitive than van gieson or sirius red alone in normal and inflamed rat colon. PloS One. 2015;10(12):e0144630. doi: 10.1371/journal.pone.0144630Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники. Л.: Медицина, 1969. 423 с.Merkulov G.A. Course of pathohistological technique. Leningrad: Meditsina, 1969. 423 p. [In Russian].

The authors declare that there are no conflicts of interest present.