Главные регуляторы лизосомального биогенеза и аутофагии транскрипционные факторы TFEB и TFE3 контролируют большинство генов белков, участвующих в формировании лизосом, посредством взаимодействия с промоторами этих генов, содержащих регуляторный мотив CLEAR. Их активация строго регулируема и происходит в ответ на нарушение лизосомального гомеостаза и повреждающие воздействия на клетки. Подобные воздействия сопровождаются активацией редокс-процессов и индукцией редокс-чувствительной сигнальной системы Keap1/Nrf2/ARE, главным назначением которой является поддержание внутреннего гомеостаза при апоптоз-индуцирующих, канцерогенных и стрессовых воздействиях. Таким образом, возникает вопрос о наличии регуляторных связей между сигнальными системами Keap1/Nrf2/ARE и TFEB(TFE3)/CLEAR. Для поиска последовательности ARE в генах TFEB и TFE3 была сформирована позиционная матрица на основании описанных в литературе 57 функциональных последовательностей ARE. ARE-подобные последовательности были маркированы в геномном браузере UCSC для анализа эволюционной консервативности, солокализации с различными функциональными модификациями ДНК и хроматина, а также с другими регуляторными элементами. В гене TFEB человека обнаружено 15 ARE-подобных мотивов. Из них последовательность, расположенная в первом интроне, является консервативной среди позвоночных животных. В гене Tfeb мыши также обнаружено 15 ARE-подобных мотивов, один из которых является консервативным, но располагается в экзоне на кодирующей стороне. Гены транскрипционного фактора TFE3 человека и мыши содержат меньше ARE-подобных последовательностей, среди них обращает на себя внимание консервативная среди позвоночных последовательность, расположенная во втором интроне. На основании данных ChIP-seq базы ENCODE проанализирован гистоновый ландшафт в соответствующих областях генома и установлено, что, вероятно, эволюционно консервативный регуляторный элемент ARE, расположенный в энхансерной области гена TFE3, играет функциональную роль.

Целью исследования было изучение способности различных фракций липопротеинов плазмы крови человека (очень низкой (ЛПОНП), низкой (ЛПНП) и высокой плотности (ЛПВП) подфракций 2 (ЛПВП₂) и 3 (ЛПВП₃)) связываться с тироксином (Т₄). Методами хроматографии на сефарозе CL-2В показано, что значительная часть меченого¹²⁵I-тироксина элюируется в объеме выхода фракции ЛПВП, что может свидетельствовать о возможности образования комплексов ЛПВП с Т₄. Процесс носил обратимый характер, поскольку введение в данную систему избыточного количества (10^-6-10^-7 М) немеченого Т₄ приводило к вытеснению¹²⁵I-Т₄ из комплексов с ЛПВП, что свидетельствует о взаимодействии типа «белок - лиганд». Исследовано влияние условий среды на образование комплексов Т₄ с ЛПВП. Повышение температуры до 40 °С приводило к более чем 50%-му снижению выхода радиоактивности с фракцией ЛПВП. Комплексообразование уменьшалось при 4 °С, однако при этом комплексы отличались наибольшей устойчивостью. Методом тушения триптофановой флуоресценции получены основные физико-химические характеристики взаимодействия Т₄ с подфракциями ЛПВП₂, ЛПВП₃. Константы комплексообразования ЛПВП с Т₄ составили порядка 10⁶-10⁷ М^-1. Наибольшее сродство к Т₄ обнаружено для частиц подфракции ЛПВП₃. Установлено, что в комплексообразовании с Т₄ принимает участие основной белковый компонент ЛПВП - аполипопротеин А-I, у которого имеется один центр связывания.

В обзоре представлены материалы, касающиеся научных принципов, лежащих в основе разработки, доклинических и клинических исследований, регистрации и контроля безопасности биоподобных (биоаналогичных) препаратов, получаемых с использованием методов генной инженерии. Количество используемых в клинике биоподобных лекарственных препаратов, определяемых как «biosimilars», неуклонно увеличивается. Отражены особенности биотехнологических препаратов, что требует необходимости особого подхода при оценке доказательства сходства/подобия вновь разработанного препарата с оригинальным (референтным) препаратом. Для обеспечения эффективности и безопасности применения биоподобных (биоаналогичных) лекарственных препаратов порядок их регистрации определяется нормативной базой, регламентирующей требования по доказательству подобия с ранее одобренным биологическим лекарственным препаратом. Отражены данные, касающиеся различий характера и объема исследований на этапах оценки качества, доклинической и клинической разработки биоподобных и оригинальных препаратов. Отражены вопросы, связанные с экстраполяцией результатов клинических исследований, и вопросы взаимозаменяемости препаратов. Приведена современная информация о международном опыте регистрации биоподобных лекарственных препаратов, научных достижениях и регуляторных требованиях, касающихся доказательства сходства/подобия при оценке качества, эффективности и безопасности биоподобных биотехнологических лекарственных препаратов («biosimilars»).

Несмотря на успехи в создании противовирусных препаратов прямого действия, сохраняется актуальность применения интерферонов в повседневной клинической практике. Парентеральное введение интерферонов сопровождается системными побочными эффектами и представляет значительные неудобства для пациентов. Для эффективного лечения гепатотропных вирусов перспективным является лекарственный препарат на основе интерферона λ-1, который должен обладать высокой энтеральной биодоступностью с целью достижения высоких концентраций в печени. Цель работы - изучение противовирусной активности перорального лекарственного средства на основе интерферона λ-1, иммобилизированного с помощью технологии электронно-лучевого синтеза на полиэтиленгликоле-1500. Материал и методы. Для изучения противовирусной активности в отношении вируса гепатита C использовались ПЦР в реальном времени, вестерн-блоттинг и иммуногистохимический метод. Результаты и их обсуждение. Исследуемое средство сохраняет противовирусную активность в отношении вируса гепатита C. Полученные с помощью разных методов результаты согласуются между собой. Пятидесятипроцентная ингибирующая доза лежит в диапазоне концентраций 0,008-0,08 нг/мл. Заключение. Иммобилизированный на полиэтиленгликоле с помощью технологии радиационного синтеза интерферон λ-1 можно рассматривать как прототип перорального лекарственного средства для лечения вирусных гепатитов, в частности гепатита С.

Цель исследования - изучить характер патоморфологических изменений передней стенки влагалища у женщин со стрессовым недержанием мочи, получавших лечение с применением эрбиевого лазера Fotona. Материал и методы. Проведен комплексный патоморфологический анализ биоптатов слизистой оболочки влагалища (СОВ) у женщин со стрессовым недержанием мочи (СНМ) до и после воздействия Er-YAG-лазером. Результаты. Показано, что ведущими характеристиками ремоделирования СОВ при СНМ являются дезорганизация фибриллярных структур (коллагеновых и эластических волокон) межклеточного матрикса, микроциркуляторные нарушения, дистрофические и атрофические изменения эпителия. После применения лазерной технологии IncontiLase в СОВ выявлены признаки стимуляции процессов неоколлагеногенеза и неоэластогенеза, усиление неоангиогенеза, восполнение популяции синтетически активных фибробластов, повышение пролиферации (увеличение индекса Ki-67-позитивных эпителиоцитов на 67 %) и улучшение структуры влагалищного эпителия. Заключение. Применение Er:YAG-лазера в коррекции СНМ у женщин потенцирует восстановление морфофункциональной организации СОВ.

Цель работы: изучить особенности вегетативной регуляции и их связь с пищевым поведением у женщин с разными типами ожирения и сахарным диабетом 2 типа (СД2). Материал и методы. Обследование женщин ( n = 106) включало антропометрические измерения, исследование и расчет вариабельности ритма сердца на аппарате «ВНС-микро» («Нейрософт», Россия), анализ пищевых дневников. Тип нарушений пищевого поведения (ПП) определяли с использованием опросника DEBQ. Результаты и их обсуждение. Топография жироотложения у женщин связана как с особенностями вегетативной регуляции, так и с нарушениями ПП. Так, у женщин с гиноидным типом распределения жира (ГТРЖ) отмечено повышение мощности спектра как высокочастотных (HF), так и низкочастотных (LF) колебаний, а при андроидном типе распределения жира (АТРЖ), наоборот, наблюдалось общее снижение мощности спектра с остаточным доминированием симпатического звена. У женщин с АТРЖ, отягощенным СД2, выявлено повышение относительного вклада в общую мощность спектра очень низких частот VLF. У лиц с ГТРЖ преобладали эмоциогенные и компульсивные нарушения ПП, с АТРЖ - экстернальные, при этом у женщин с АТРЖ, отягощенным СД2, выраженность нарушений ПП была минимальной. Увеличение активности симпатического и парасимпатического отделов вегетативной нервной системы у женщин с ГТРЖ сочеталось с симпатоадреналовыми и вагоинсулярными реакциями, что подтверждается положительной корреляционной связью эмоциогенного ПП с HF и LF, и отрицательной корреляционной связью ограничительного ПП с LF. У женщин с АТРЖ выявлена отрицательная корреляционная связь эмоциогенного ПП с VLF, а при сочетании АТРЖ с СД2 не обнаружено ни одной корреляционной связи показателей ПП с активностью отделов вегетативной нервной системы, что может быть связано с проявлениями диабетической вегетативной нейропатии.

Цель исследования - изучить эффективность хирургического лечения эндотелиально-эпителиальной дистрофии (ЭЭД) роговицы с помощью оперативного вмешательства, включающего внутрикамерное введение суспензии аутологичных мононуклеаров крови с последующим ее наслоением на внутреннюю поверхность роговой оболочки. Материал и методы. Клинические исследования проведены среди 44 пациентов, составивших две группы: основную (21 пациент) и сравнения (23 пациента). В основной группе лечение проводилось новым методом, в группе сравнения применялась традиционная фармакотерапия. Результаты и их обсуждение. Уменьшение гидратации роговицы в основной группе отмечалось в течение первых 5 дней после хирургического лечения, в группе сравнения незначительное уменьшение отека роговицы начиналось на 10-12 день. Через 1 мес. после лечения показатель пахиметрии в основной группе уменьшился на 11 %, в группе сравнения - на 3,1 %, острота зрения повысилась в 5,0 и 2,0 раза соответственно. Вывод. Применение метода хирургического лечения ЭЭД роговицы способствует более быстрому уменьшению гидратации роговицы с восстановлением ее нормальной толщины и значительным и стабильным улучшением остроты зрения в послеоперационном периоде по сравнению с курсом консервативного лечения.

Цель исследования - изучить структурные особенности клеточных популяций печени и слизистой оболочки желудка пациентов с маркерами HCV- и HBV-инфекции при различной степени колонизации Helicobacter pylori . Материал и методы. Проведено клинико-морфологическое исследование 95 пациентов с маркерами HCV- и HBV-инфекции (52 мужчины и 43 женщины в возрасте от 16 до 66 лет) и с желудочной дисфункцией, а также 56 больных с хроническим гастритом; результаты сопоставлены со степенью инфицирования H. pylori . Результаты и их обсуждение. Показано, что у всех пациентов с хроническим гепатитом в патологический процесс вовлекается слизистая оболочка желудка, при этом преобладает фиброзирующая форма поражения - гастропатия. Существенной корреляции структурных изменений со степенью активности гепатита, а также с наличием H. pylori не выявлено. Анализ структурных изменений желудка у пациентов с хроническим гастритом показал, что при высокой степени активности Н. pylori в слизистой оболочке желудка преобладает катарально-фиброзирующий процесс, при отсутствии H. pylori доминируют фиброзирующие изменения.

В последние годы происходит интенсивный рост числа наследственных заболеваний костно-мышечной системы, таких как несовершенный остеогенез и фосфат-диабет. Восстановление целостности поврежденных костей при данных патологиях остается одной из сложных и до конца не решенных проблем травматологии и ортопедии. Репаративная регенерация костной ткани характеризуется многоэтапностью течения и зависит от многочисленных факторов. Регуляторами костно-клеточного метаболизма при репарации являются факторы роста. Обширные костные дефекты, хроническая гипоксия при наследственных заболеваниях соединительной ткани представляют собой неблагоприятные условия восстановления поврежденных костей. В таких случаях очевидна необходимость изучения концентрации остеотропных факторов роста и их рецепторов в сыворотке крови у пациентов с наследственными заболеваниями костно-мышечной системы. Материал и методы. Мы исследовали иммуноферментным методом содержание факторов роста и их рецепторов, маркеров метаболизма костной ткани и витамина D в сыворотке крови пациентов с фосфат-диабетом и несовершенным остеогенезом на этапах хирургического лечения. Анализ проводили в соответствии с методикой из руководства к наборам eBioscience (TGF-β1, TGF-β2, VEGF-A, VEGF-R2, VEGF-R3), Immunodiagnostic systems (IGF-1, остеокальцин, витамин D, C-телопептиды коллагена I типа), Invitrogen (VEGF), RayBiotech Inc. (FGF-1, FGF-2, TGF-α, SCF, SCFsR), Mediagnost (IGF-2), QULDEL (пиридинолин), Enzo (DKK-1). Результаты. Нам удалось установить, что концентрация факторов роста IGF-1, VEGF, FGF-2, TGF-β1, TGF-β2 и их рецепторов VEGF-R3, SCFsR, маркеров метаболизма костной ткани остеокальцина и пиридинолина, а также витамина D в крови пациентов разных групп на этапах лечения отличаются между собой. Однако содержание IGF-1, VEGF-R2 до операции и ТGF-α на 60 сутки, SCF на 60 сутки у пациентов с фосфат-диабетом и несовершенным остеогенезом одинаково.

Цель исследования - изучить связь пятисуточного кумулятивного водного баланса с исходом критического состояния у хирургической группы новорожденных. Материал и методы. В исследовании участвовали 30 новорожденных с некротическим энтероколитом в стадии IIIB по Уолшу - Клигмену. Группы сформированы по критерию исхода. Анализируемые параметры: возраст и масса тела участников, гематокритное число; кумулятивный водный баланс за 5 суток наблюдения, выраженный в процентах к исходной массе тела. Статистическая обработка результатов проведена методиками непараметрической статистики. Результаты и их обсуждение. Единственным независимым фактором, определяющим вероятность летального исхода при некротическом энтероколите новорожденных, является гестационный срок и его производное - масса тела. Вероятность неблагоприятного исхода при некротическом энтероколите новорожденных не зависит от пятисуточного кумулятивного водного баланса.

Дистония является гиперкинезом, характеризующимся непроизвольно повторяющимися сокращениями мышц в одной или нескольких областях тела и приводящих к возникновению патологической позы и нарушению произвольных движений [22, 29]. Такое определение наиболее распространено, но, учитывая фенотипический полиморфизм, характерный для этой патологии, не является полностью исчерпывающим. Отсутствие единой методологии и полиморфизм клинических проявлений заболевания затрудняют проведение эпидемиологических исследований, что сказывается на их полноте и достоверности. Механизм реализации дистонического гиперкинеза остается до сих пор недостаточно изученным. В настоящее время в качестве ведущей гипотезы выступает мультифакториальность заболевания, согласно которой генетическая детерминированность может проявиться под воздействием экзогенных факторов. Диагноз цервикальной дистонии является клиническим и устанавливается на проявлениях патологической позы головы и шеи. Заболевание начинается в трудоспособном возрасте и протекает с формированием функционального дефицита, приводящего к трудностям бытового и профессионального характера. Это в свою очередь формирует предпосылки для возникновения психологической, социальной дезадаптации, а также инвалидизации больных [2, 3, 10, 15]. Доказанным и эффективным методом лечения цервикальной дистонии является применение ботулинического токсина типа А (класс рекомендации А).

Раннее выявление нарушений зрения детей позволяет офтальмологам своевременно назначать профилактические мероприятия и лечение, стабилизировать развитие патологии и предотвращать возникновение осложнений. Тем не менее существующая система офтальмологической службы не позволяет проводить регулярные медицинские осмотры всех детей школьного возраста. Целью нашего исследования было разработать и внедрить в практику метод дистанционного скринингового обследования школьников с использованием средств телекоммуникации. Материал и методы. Мы разработали интерактивную компьютерную программу для дистанционного исследования остроты зрения, функционального состояния рефракции, диагностики астигматизма и патологии макулярной области. Результаты исследования автоматически записывались в компьютерную базу данных. Программа была размещена на сайте нашей клиники. Скрининг проводился одновременно для 5 школьников, которые сидели в компьютерном классе своих школ. В зависимости от количества проводимых тестов исследование длилось от 4 до 8 мин для группы. Результаты и их обсуждение. Дистантный скрининг зрения проведен 28983 школьникам. Острота зрения 1,0-0,9 выявлена у 14 345 человек (49,5 %), 0,8-0,2 - у 11 187 человек (38,6 %) и ниже 0,1 - у 3451 человека (11,9 %). Тест не является специфичным по виду патологии, но позволяет сделать вывод, что сниженное зрение имеет место более чем у половины школьников. Метод дистанционного обследования зрения надежен и высокоэффективен. База данных результатов обследования помогает диагностировать патологию на ранней стадии, отслеживать ее динамику и своевременно информировать родителей о необходимости расширенного обследования и офтальмологического лечения их детей.

Недостаточно изучен вопрос об особенностях течения инсульта у лиц, работающих в условиях воздействия неблагоприятных профессионально-производственных факторов. Цель исследования - оценить степень тяжести течения инсульта и выраженность неврологического дефицита в остром периоде инсульта у мужчин, подвергавшихся воздействию производственных факторов физической и химической природы. Проведен анализ динамики восстановления в остром периоде инсульта у 241 больного (основная группа), подвергавшихся воздействию вредных профессионально-производственных факторов (общая вибрация, производственный шум, электромагнитное излучение (ЭМИ), токсико-пылевой фактор). Группой сравнения явились 76 пациентов с инсультом, не работавших в условиях воздействия вредных профессионально-производственных факторов. Для объективизации тяжести состояния и оценки выраженности неврологического дефицита использовалась шкала Национального института здоровья (NIHSS, National Institutes of Health Stroke Scale) при поступлении и в динамике острого периода инсульта на 21-й день заболевания (NIHSS 1 и NIHSS 2). Установлен исходно выраженный дефицит (шкала NIHSS 1) у больных инсультом в основной группе, в отличие от пациентов группы сравнения, наиболее выраженный у мужчин, контактировавших с ЭМИ. Достоверные различия между показателями исходного неврологического дефицита основной группы и группы сравнения обнаружены только среди молодых мужчин, имевших контакт с ЭМИ, а также с токсико-пылевым фактором. Лучшая динамика восстановления в остром периоде инсульта выявлена в группе сравнения, а в основной группе - у лиц молодого возраста, за исключением производственной группы с влиянием токсико-пылевого фактора. У больных ишемическим инсультом минимальный неврологический дефицит к исходу острого периода был в группе сравнения и среди молодых мужчин основной группы, имевших влияние общей вибрации, а также шума. Тяжелое течение геморрагического инсульта установлено в группе сравнения, а в основной группе - среди больных, имевших контакт с ЭМИ. У мужчин пожилого возраста основной группы наблюдалась максимальная выраженность неврологического дефицита, за исключением больных, имевших влияние токсико-пылевого фактора.