Хронотропное действие иммобилизированных субтилизинов при перфузии изолированного сердца крысы

Преференциальным способом оценки первичной фармакодинамики исследуемых препаратов являются фармакологические эксперименты на изолированных органах (ex vivo), так как данный способ полностью исключает системное влияние нейрогуморальной регуляции. В последнее десятилетие сформировалась новая группа тромболитических лекарственных препаратов на основе иммобилизированных субтилизинов. На этапе регистрационных доклинических и клинических исследований их плейотропные фармакологические эффекты не изучались. Между тем есть основания считать, что их фармакологическая активность в кровеносном русле не ограничивается тромболитическим действием, а может оказаться расширенной до системного воздействия на сердечно-сосудистую систему.

Цель исследования – изучить хронотропные эффекты изолированного сердца при его перфузии растворами иммобилизированных субтилизинов в разных концентрациях. 
Материал и методы. В исследовании использована модель изолированного сердца крысы по Лангендорфу. В эксперимент включено 50 крыс линии Вистар, разделенных на пять групп: выделенные сердца, перфузируемые только раствором Кребса – Хензеляйта (контроль) или иммобилизированными субтилизинами в четырех концентрациях (170, 340, 510 и 1020 Ед/л). 
Результаты и их обсуждение. Иммобилизированные субтилизины обладают отрицательным хронотропным эффектом. Начало эффекта зависит от концентрации препарата в растворе: чем она больше, тем раньше проявляется эффект. С 5-й по 10-ю минуту перфузии отрицательный хронотропный эффект отмечается при применении иммобилизированных субтилизинов в любой дозе. Длительность его нарастания проявляется до 10–20 минуты в зависимости от концентрации препарата в растворе. После 20-й минуты перфузии достигнутый отрицательный хронотропный эффект сохраняется на уровне плато до 40-й минуты. 
Заключение. Иммобилизированные субтилизины обладают самостоятельным фармакологическим эффектом на частоту сердечных сокращений. 

1. Langendorff O. Untersuchungen am uberlebenden Saugetierherzen. Pflugers Arch. 1895;61:291–332. doi: 10.1007/BF01812150

2. Королев Д.В., Минасян С.М., Галагудза М.М. Исследовательская установка для регистрации поверхностной электрограммы изолированного сердца лабораторных животных. Биотехносфера. 2014;(5):49–53.

3. Торопова Я.Г., Мухамадияров Р.А., Головкин А.С. Влияние различных концентраций липосомальной формы эмоксипина на коронарный поток, сократительную и насосную функции изолированного сердца крысы в условиях тотальной нормотермической ишемии и реперфузии. Рос. физиол. ж. 2013;99(7):869–875.

4. Хисамиева Л.И., Чершинцева А.М., Купцова А.М., Зиятдинова Н.И., Зефиров Т.Л. Блокада α2-адренорецепторов ингибирует работу изолированного по Лангендорфу сердца крысы. Бюл. эксперим. биол. и мед. 2021;172(9):273–276. doi: 10.47056/0365-9615-2021-172-9-273-276

5. Байкалов Г.И., Князев Р.А., Ершов К.И., Бахарева К.И., Солдатова М.С., Мадонов П.Г. Изучение влияния иммобилизированных субтилизинов на коронарный кровоток в эксперименте на изолированном сердце крысы. J. Sib. Med. Sci. 2021;(3):56–65. doi: 10.31549/2542-1174-2021-3-56-65

6. Bell R.M., Mocanu M.M., Yellon D.M. Retrograde heart perfusion: the Langendorff technique of isolated heart perfusion. J. Mol. Cell. Cardiol. 2011;50(6):940–950. doi: 10.1016/j.yjmcc.2011.02.018

7. Olejnickova V., Novakova M., Provaznik I. Isolated heart models: cardiovascular system studies and technological advances. Med. Biol. Eng. Comput. 2015;53(7):669–678. doi: 10.1007/s11517-015-1270-2

8. Watanabe M., Okada T. Langendorff perfusion method as an ex vivo model to evaluate heart function in rats. Methods Mol. Biol. 2018;1816:107–116. doi: 10.1007/978-1-4939-8597-5_8

9. Мадонов П.Г., Мишенина С.В., Киншт Д.Н., Кихтенко Н.В. Химические и фармакологические свойства субтилизинов. Сиб. науч. мед. ж. 2016;36(3):13–22.

10. Мадонов П.Г., Мишенина С.В., Киншт Д.Н., Кихтенко Н.В. Таргетная фармакодинамика субтилизинов. Сиб. науч. мед. ж. 2016;36(4):15–23.

11. Madonov P., Leont’ev S., Zotov S., Ufimtsev M., Mishenina S., Kinsht D. Initial results of oral thrombolytic agent clinical application. Proceedings: proc. 25th Biennial international congress on thrombosis, Venice, Italy, May 23–26, 2018. Venice. 2018;2(9):530. doi: 10.3390/proceedings2090530

12. Мадонов П.Г., Момот А.П., Мамаев А.Н., Ройтман Е.В., Мишенина С.В. Неплазминовый фибринолиз субтилизинами. Тромбоз, гемостаз и реол. 2019;(3):24–32. doi: 10.25555/THR.2019.3.0886

13. Мишенина С.В., Байкалов Г.И., Байкалова Н.Е., Макаров В.К., Мадонов П.Г. Обоснование применения иммобилизированных субтилизинов для таргетной терапии венозных тромбозов. J. Sib. Med. Sci. 2020;(1):76–88. doi: 10.31549/2542-1174-2020-1-76-88

14. Мадонов П.Г., Мишенина С.В., Ройтман Е.В., Ищенко Н.А. Фармакологический тромболизис, что нового? Тромбоз, гемостаз и реол. 2020;(2):40–52. doi: 10.25555/THR.2020.2.0917