Влияние новых противоопухолевых соединений на основе производных азолоазинов на уровень повреждений ДНК нормальных клеток линии Vero в тесте ДНК-комет

Цель работы – изучить влияние новых производных азолоазинов на уровень ДНК-повреждений клеток линии Vero in vitro методом щелочного гель-электрофореза (тест ДНК-комет).

Материал и методы. Объекты исследования – 8-(пиперидинокарбонил)-3-циклогексилимидазо[5,1-d][1,2,3,5]тетразин-4(3Н)-он (1), диэтиловый эфир 4-аминоимидазо[5,1-с][1,2,4]триазин-3,8-дикарбоновой кислоты (2), 4-aмино-8-этоксикарбонилимидазо[5,1-с] [1,2,4]триазин-3-N-(п-толуил)карбоксамид (3). Препаратом сравнения выбран эпирубицин. Соединения применялись в дозах 1/2, 1/10 и 1/50 IC50. В качестве клеточной модели выбрана линия клеток Vero, культивируемая согласно стандартному протоколу. Для оценки генотоксичности применялся щелочной вариант метода ДНКкомет, обладающий высокой чувствительностью и позволяющий выявлять повреждения ДНК.

Результаты и обсуждение. Анализ полученных данных свидетельствует, что тестируемые соединения 1–3 увеличивают количество повреждений ДНК в неопухолевых клетках. Наиболее выраженным генотоксическим действием обладает соединение 1. Так, использование этого вещества в дозе ½ IC50 привело к достоверному возрастанию длины хвоста кометы в 1,5 раза. Отмечено, что количество повреждений ДНК при действии соединения 1 в исследуемых дозах и эпирубицина находилось на одном уровне.

Заключение. Полученные результаты доказывают, что соединения 1–3 могут обладать потенциально канцерогенным действием. Однако это предположение требует дальнейших углубленных экспериментальных исследований.

1. Руководство по химиотерапии опухолевых заболеваний. Ред. Н.И. Переводчикова, В.А. Горбунова. М.: Практическая медицина, 2005, 704 с.

2. Чу Э., де Вита-младший В. Химиотерапия злокачественных новообразований. М.: Практика, 2009. 455 с.

3. Juarez-Moreno K., Gonzalez E.B., GirónVazquez N., Chávez-Santoscoy R.A., Mota-Morales J.D., Perez-Mozqueda L.L., Garcia-Garcia M.R., Pestryakov A., Bogdanchikova N. Comparison of cytotoxicity and genotoxicity effects of silver nanoparticles on human cervix and breast cancer cell lines. Hum. Exp. Toxicol. 2017;36(9):931–948. doi: 10.1177/0960327116675206

4. Синайко В.В., Артемова Н.А., Юркштович Т.Л., Бычковский П.М., Фроленков К.А. Сравнительная эффективность препаратов темобел и темодал в комплексном лечении высокозлокачественных (GRADE III–IV) глиальных опухолей головного мозга. Рос. биотерапевт. ж. 2015;14(2):59–64. doi: 10.17650/1726-9784-2015-14-2-59-64

5. Abdel-Rahman O., Fouad M. Temozolomide-based combination for advanced neuroendocrine neoplasms: A systematic review of the literature. Future Oncol. 2015;8(11):1275–1290. doi: 10.2217/fon.14.302

6. Садчикова Е.В., Мокрушин В.С. Взаимодействие 3,8-дизамещенных имидазо[5,1-c] [1,2,4]триазинов с нуклеофилами. Химия гетероцикл. соед. 2014;(7):1100–1106.

7. Садчикова Е.В. Синтез новых азоло[5,1-d] [1,2,3,5]тетразин-4-онов – аналогов противоопухолевого препарата темозоломид. Изв. РАН. Сер. хим. 2016;(7):1867–1872.

8. Коненков В.И., Рачковская Л.Н., Летягин А.Ю., Боровская Т.Г., Шурлыгина А.В., Робинсон М.В., Королев М.А., Котлярова А.А., Попова Т.В., Рачковский Э.Э., Вычужанина А.В., Машанова В.А. Исследование ДНК-повреждающего действия нового нормотимического лекарственного средства на основе комплекса лития цитрата, полиметилсилоксана и оксида алюминия методом ДНК-комет in vivo. Сиб. науч. мед. ж. 2018;38(4):5– 10. doi: 10.15372/SSMJ20180401

9. Тюкавин А.И., Сучков С.В. Опухолевый рост – современный взгляд на патогенез и фармакотерапию (лекция). Формулы фармации. 2021;3(2):86–96. doi: 10.17816/phf65284

10. Хумаири А.Х., Сперанский Д.Л., Садчикова Е.В. Синтез и цитотоксическая активность новых производных азолотриазина при изучении на клеточных культурах. Хим.-фармац. ж. 2022;56(6):17– 22. doi: 10.1007/s11094-022-02704-0

11. Гайдай Е.А., Дорофеева А.А., Крышень К.Л., Гайдай Д.С. Методические аспекты проведения ДНК-комет-теста в условиях in vivo в доклинических исследованиях. Лаб. живот. для науч. исслед. 2020;(3):16–24. doi: 10.29296/2618723X-2020-03-03

12. Andreani N.A., Renzi S., Piovani G., Marsan P.A., Bomba L., Villa R., Ferrari M., Dotti S. Potential neoplastic evolution of Vero cells: in vivo and in vitro characterization. Cytotechnology. 2017;69(5):741–750. doi: 10.1007/s10616-017-0082-7

13. Хумаири А.Х., Островский О.В., Зыкова Е.В., Сперанский Д.Л., Алексеева Д.Л., Садчикова Е.В. Цитотоксическая активность производных азолотриазина при изучении в культуре клеток рака молочной железы человека MCF. Вестн. ВолгГМУ. 2022; 19(1):133–141. doi: 10.19163/1994-9480-202219-1-133-141

14. Оценка генотоксических свойств методом ДНК-комет in vitro: Методические рекомендации МР 4.2.0014-10. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2011, 16 с.

15. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. М.: Гриф и К, 2013, 944 с.

16. Саватеев К.В., Уломский Е.Н., Буторин И.И., Чарушин В.Н., Русинов В.Л., Чупахин О.Н. Азолоазины – антагонисты А2αрецептора. Структура и свойства. Успехи химии. 2018;87(7):636–669. doi: 10.1070/RCR4792

17. Garza-Morales R., Gonzalez-Ramos R., Chiba A., Montes de Oca-Luna R., McNally L.R., McMasters K.M., Gomez-Gutierrez J.G. Temozolomide enhances triple-negative breast cancer virotherapy in vitro. Cancers (Basel). 2018;10(5): e144. doi: 10.3390/cancers10050144

18. Хумаири А.Х., Сперанский Д.Л., Рыбалкина О.Ю., Садчикова Е.В., Булдаков М.А., Фролова А.А., Чердынцева Н.В., Удут В.В. Генотоксические эффекты новых производных азолоазинов с противоопухолевой активностью в культуре клеток MCF-7. Хим.-фармац. ж. 2023;57(6):24–29. doi: 10.30906/0023-1134-2023-57-6-24-29

19. Свирновский А.И. Резистентность опухолевых клеток к терапевтическим воздействиям как медико-биологическая проблема. Мед. новости. 2011;9:30–38.

20. Ramis G., Thomàs-Moyà E., de Mattos S.F., Rodríguez J., Villalonga P. EGFR inhibition in glioma cells modulates rho signaling to inhibit cell motility and invasion and cooperates with temozolomide to reduce cell growth. PLoS One. 2012;7(6):e38770. doi: 10.1371/journal.pone.0038770

21. Tatar Z., Thivat E., Planchat E., Gimberques P., Gadea E., Abrial C., Durando X. Temozolomide and unusual indications: Review of literature. Cancer Treat. Rev. 2013;39(2):125–135. doi: 10.1016/j.ctrv.2012.06.002