Результаты валидации нового метода определения активности α-амилазы человека для диагностики патологий поджелудочной железы
https://doi.org/10.18699/SSMJ20210411
Аннотация
Активность α-амилазы в крови является ключевым лабораторным маркером заболеваний поджелудочной железы. В то же время некоторые из используемых для ее определения методов имеют ряд существенных недостатков и ограничений, и в настоящее время ведется разработка новых более эффективных способов. Целью данной работы явилась сравнительная оценка эффективности применения в клинической лабораторной диагностике двух методов определения активности общей и панкреатической α-амилазы в крови человека: основанного на использовании в качестве субстрата 4,6-этилиден-(G7)-п-нитрофенил-(G1)-α,D-мальтогептаозида (EPS-G7) и 2-хлоро-4-нитрофенил-4-O-β-D-галактопиранозилмальтозида (GalG2CNP). Для этого в параллельных исследованиях проанализированы образцы сыворотки крови пациентов с различной активностью α-амилазы. С использованием очищенных препаратов α-амилазы определены основные аналитические характеристики метода с субстратом GalG2CNP. Полученные результаты продемонстрировали высокий уровень корреляции обоих методов и точности измерения в рабочей области определения активности изоферментов α-амилазы. Таким образом, метод определения активности α-амилазы с использованием в качестве субстрата GalG2CNP обладает аналогичными по сравнению с распространенным методом с субстратом EPS-G7 аналитическими характеристиками, но вместе с тем имеющиеся преимущества позволяют рекомендовать его к более широкому применению в клинической лабораторной диагностике и научных исследованиях.
Об авторах
К. А. Черемисина
АО «Вектор-Бест»
Россия
Россия
Ксения Александровна Черемисина
630559, Новосибирская обл., р. п. Кольцово, Научно-производственная зона, 36
Г. Е. Яковлева
АО «Вектор-Бест»
Россия
Россия
Галина Евгеньевна Яковлева, к.б.н.
630559, Новосибирская обл., р. п. Кольцово, Научно-производственная зона, 36
А. В. Барабошкина
АО «Вектор-Бест»
Россия
Россия
Анастасия Васильевна Барабошкина
630559, Новосибирская обл., р. п. Кольцово, Научно-производственная зона, 36
Э. Ф. Аглетдинов
АО «Вектор-Бест»
Россия
Россия
Эдуард Феликсович Аглетдинов, д.м.н.
630559, Новосибирская обл., р. п. Кольцово, Научно-производственная зона, 36
Список литературы
1. Kokosis G., Perez A., Pappas T.N. Surgical management of necrotizing pancreatitis: an overview. World J. Gastroenterol. 2014; 20 (43): 16106–16112. doi: 10.3748/wjg.v20.i43.16106
2. Matull W.R., Pereira S.P., O’Donohue J.W. Biochemical markers of acute pancreatitis. J. Clin. Pathol. 2006; 59 (4): 340–344. doi: 10.1136/jcp.2002.002923
3. Leese T., Shaw D., Holliday M. Prognostic markers in acute pancreatitis: can pancreatic necrosis be predicted? Ann. R. Coll. Surg. Engl. 1988; 70 (4): 227–232.
4. van Santvoort H.C., Bakker O.J., Bollen T.L., Besselink M.G., Ahmed Ali U., Schrijver A.M., Boermeester M.A., van Goor H., Dejong C.H., van Eijck C.H., van Ramshorst B., Schaapherder A.F., van der Harst E., Hofker S., Nieuwenhuijs V.B., Brink M.A., Kruyt P.M., Manusama E.R., van der Schelling G.P., Karsten T., Hesselink E.J., van Laarhoven C.J., Rosman C., Bosscha K., de Wit R.J., Houdijk A.P., Cuesta M.A., Wahab P.J., Gooszen H.G., Dutch Pancreatitis Study Group. A conservative and minimally invasive approach to necrotizing pancreatitis improves outcome. Gastroenterology. 2011; 141 (4): 1254–1263. doi: 10.1053/j.gastro.2011.06.073
5. Rosenmund H., Kaczmarek M.J. Isolation and characterization of isoenzyme of human salivary and pancreatic alpha-amylase. Clin. Chem. Acta. 1976; 71 (2): 185–189. doi: 10.1016/0009-8981(76)90529-5
6. Takeuchi T. Human amylase isoenzymes separated on concanavalin A-Sepharose. Clin. Chem. 1979; 25 (8): 1406–1410.
7. Marini J.J., Wheeler A.P. Critical care medicine: The essentials. Crit. Care. 2010; 14 (4): 317. doi: 10.1186/cc9204
8. Балябина М.Д., Слепышева В.В., Козлов А.В. Методы определения α-амилазы. Лабораторная диагностика. 2007; 14 (2): 26–32.
9. Svens E., Kapyaho K., Tanner P., Weber T.H. Immunocatalitic assay of pancreatic alpha-amylase in serum and urine with a specific monoclonal antibody. Clin. Chem. 1989; 35 (4): 662–664.
10. Mifflin T.E., Benjamin D.C., Bruns D.E. Rapid quantative, specific measurement of pancreatic amylase in serum with use of monoclonal antibody. Clin. Chem. 1985; 31 (8): 1283–1288.
11. Kruse-Jarres J.D., Kaiser C., Hafkenscheid J.C., Hohenwallner W., Stein W., Bohner J., Klein G., Poppe W., Rauscher E. Evaluation of a new α-amylase assay using 4,6-ethylidene-(G)-1-4-nitrophenyl-(G1)- α-D-maltoheptaoside as substrate. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1988; 27 (2): 103–113.
12. Lorentz K. IFCC method for measurement of catalytic concentration of enzymes. Part 9. IFCC method for α-amylase [1,4-α-D-glucan 4-glucanohydrolase, EC 3.2.1.1]. Indian J. Clin. Biochem. 1997; 12 (1): 1–24. doi: 10.1007/BF02867950
13. Makise J., Amakawa T., Nakayama T. Problems in the measurement of α-amylase activity using 4-nitrophenyl maltooligosaccharides as the substrate. Jpn. J. Clin. Chem. 1986; 15: 59–67.
14. Dupuy G., Hilaire G., Au C. Rapid determinationof a-amylase activity by use of a new chromogenic substrate. Clin. Chem. 1987; 33 (4): 524–528.
15. Яковлева Г.Е., Черемисина К.А. Реагент для определения общей α-амилазы. Пат. РФ № 2417374; опубл. 27.04.2009.
16. Яковлева Г.Е., Черемисина К.А. Набор реагентов для определения активности панкреатической α-амилазы. Пат. РФ № 2417373; опубл. 27.04.2011.
17. Morishita Y., Iinuma Y., Nakashima N., Majima K., Mizuguchi K., Kawamura Y. Total and pancreatic amylase measured with 2-Chloro-4-nitrophenyl- 4-O-β-D-galactopyranosylmaltoside. Clin. Chem. 2000; 46 (7): 928–933.
18. Меньшиков В.В. Обеспечение качества лабораторных исследований. Преаналитический этап. М.: Юнимед-пресс, 2003. 312 c.
19. Tietz N.W., Burlina A., Gerhardt W., Junge W., Malfertheiner P., Murai T., Otte M., Stein W., Gerber M., Klein G. Multicenter evaluation of a specific pancreatic isoamylase assay based on a double monoclonal- antibody technique. Clin. Chem. 1988; 34 (10): 2096–2102.
20. Carroll J.K., Herrick B., Gipson T., Lee S.P. Acute pancreatitis: diagnosis, prognosis, and treatment. Am. Fam. Physician. 2007; 75 (10): 1513–1520.
21. Методические рекомендации «Валидация методов клинических лабораторных исследований». Справ. зав. КДЛ. 2014; 6: 53–68.
22. Контроль качества клинических лабораторных исследований. Часть 1. Пределы допускаемых погрешностей результатов измерения аналитов в клинико-диагностических лабораториях. ГОСТ Р 53133.1-2008. М.: Стандартинформ, 2009. 31 c.
Рецензия
Просмотров:
358
Послать статью по эл. почте 