Определение осмотической резистентности эритроцитов методом проточной цитометрии у пациентов с наследственным сфероцитозом
https://doi.org/10.15372/SSMJ20200312
Аннотация
Для диагностики наследственного сфероцитоза используется тест осмотической резистентности, оценивающий выраженность гемолиза в серии гипотонических растворов хлорида натрия, который требует больших временных и трудозатрат и обладает невысокой чувствительностью и специфичностью. Предложены новые методики оценки осмотической резистентности при помощи проточной цитометрии, но они недостаточно стандартизованы. Цель исследования – разработка и апробация метода определения осмотической резистентности эритроцитов с помощью проточной цитометрии у пациентов с наследственным сфероцитозом. Материал и методы. Проводилось обследование 33 пациентов с наследственным сфероцитозом и 30 детей контрольной группы. Метод включал исследование препаратов крови в фосфатно-солевом буфере и их серийных разведений в дистиллированной воде при помощи проточной цитометрии – как в свежей крови, так и после 24-часовой инкубации. Оценивалась доля сохранных (не гемолизированных) эритроцитов. В качестве референтных интервалов использованы 5-й и 95-й процентили показателей контрольной группы. Результаты и их обсуждение. Среди лиц с наследственным сфероцитозом до инкубации патологические изменения хотя бы в двух разведениях были выявлены у 81,8 % пациентов, после инкубации патологические изменения обнаружены еще у 4 из 6 пациентов. Диагностическая чувствительность теста 93,9 %, диагностическая специфичность 83,3 %, прогностическая ценность положительного результата (PPV) 86,1 %, прогностическая ценность отрицательного результата (NPV) 92,6 %. Таким образом, предложенный метод с установлением референтных значений позволяет быстро и объективно оценить осмотическую резистентность эритроцитов и может применяться для дифференциальной диагностики при наследственном сфероцитозе.
Об авторах
Е. Ф. Мицура
Республиканский научно-практический центр радиационной медицины и экологии человека
Беларусь
Екатерина Федоровна Мицура246040, г. Гомель, ул. Ильича, 290
Беларусь
Екатерина Федоровна Мицура246040, г. Гомель, ул. Ильича, 290
Ж. Н. Пугачева
Республиканский научно-практический центр радиационной медицины и экологии человека
Беларусь
Жанна Никитична Пугачева246040, г. Гомель, ул. Ильича, 290
Беларусь
Жанна Никитична Пугачева246040, г. Гомель, ул. Ильича, 290
Л. И. Волкова
Белорусская медицинская академия последипломного образования
Беларусь
Беларусь
Людмила Ивановна Волкова, к.м.н.
220013, г. Минск, ул. Петруся Бровки, 3, корп. 3
Список литературы
1. Максимов А.Г., Тыренко В.В., Голота А.С., Живописцева А.М., Малахова С.Н., Петрова Т.Н., Зайцева Т.С. Современные представления о наследственном микросфероцитозе. Вестн. гематологии. 2009; 5 (3): 36–44. @@ Maximov A.G., Tyrenko V.V., Golota A.S., Zhivopistseva A.M., Malakhova S.N., Petrova T.N., Zaitseva T.S. The modern conception of hereditary spherocytosis. Vestnik gematologii = Bulletin of Hematology. 2009; 5 (3): 36–44. [In Russian].
2. Haley K. Congenital hemolytic anemia. Med. Clin. North. Am. 2017; 101 (2): 361–374. doi: 10.1016/j.mcna.2016.09.008.
3. Blanc L., Wolfe L.C. General considerations of hemolytic diseases, red cell membrane, and enzyme defects. In: Lanzkowsky’s manual of Pediatric Hematology and Oncology. 6th ed. Academic Press, 2016: 137–146.
4. King M.J., Garçon L., Hoyer J.D., Iolascon A., Picard V., Stewart G., Bianchi P., Lee S.H., Zanella A., International council for standardization in haematology. ICSH guidelines for the laboratory diagnosis of nonimmune hereditary red cell membrane disorders. Int. J. Lab. Hematol. 2015; 37 (3): 304–325. doi: 10.1111/ijlh.12335
5. Mahajan V., Jain S.K. Hereditary spherocytosis. Neo Reviews. 2016; 17 (12): 697–704. doi: 10.1542/neo.17-12-e697
6. Farias M.G. Advances in laboratory diagnosis of hereditary spherocytosis. Clin. Chem. Lab. Med. 2016; 55 (7): 944–948. doi: 10.1515/cclm-2016-0738
7. Roper D., Layton M. Investigation of the hereditary haemolytic anaemias: membrane and enzyme abnormalities. In: Dacie and Lewis Practical Haematology. 11th ed. Elsevier Ltd, 2011. 245–250.
8. Won D.I., Suh J.S. Flow cytometric detection of erythrocyte osmotic fragility. Cytometry B. Clin. Cytom. 2009; 76B: 135–141. doi: 10.1002/cyto.b.20448
9. Warang P., Gupta M., Kedar P., Ghosh K., Colah R. Flow cytometric osmotic fragility – an effective screening approach for red cell membranopathies. Cytometry B. Clin. Cytom. 2011; 80 (3): 186–190. doi: 10.1002/cyto.b.20583
10. Yamamoto A., Saito N., Yamauchi Y., Takeda M., Ueki S., Itoga M., Kojima K., Kayaba H. Flow cytometric analysis of red blood cell osmotic fragility. J. Lab. Autom. 2014; 19 (5): 483–487. doi: 10.1177/2211068214532254
11. Shim Y.J., Won D.I. Flow cytometric osmotic fragility testing does reflect the clinical severity of hereditary spherocytosis. Cytometry B. Clin. Cytom. 2014; 86B: 436–443. doi: 10.1002/cyto.b.21143
12. Ciepiela O., Adamowicz-Salach A., Zgodzińska A., Łazowska M., Kotuła I. Flow cytometric osmotic fragility test: Increased assay sensitivity for clinical application in pediatric hematology. Cytometry. B. Clin. Cytom. 2018; 94 (1): 189–195. doi: 10.1002/cyto.b.21511
13. Manivannan P., Tyagi S., Chandra D., Mishra P., Pati H.P., Saxena R. Flow cytometric analysis of patients with hereditary spherocytosis – an Indian scenario. Hematology. 2018; 23 (3): 175–180. doi: 10.1080/10245332.2017.1376855
Рецензия
Просмотров:
1297
Послать статью по эл. почте 