sibmedСибирский научный медицинский журналСибирский научный медицинский журнал2410-25122410-2520ИЦиГ СО РАН10.15372/SSMJ20190101sibmed-97Research ArticleМЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИBIOMEDICINEСИСТЕМНЫЕ ГЕМОСТАТИЧЕСКИЕ И ПРОТРОМБОТИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ ФИБРИН-МОНОМЕРА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ ПРИ ДОЗИРОВАННОЙ ТРАВМЕ ПЕЧЕНИSYSTEMIC HEMOSTATIC AND PROTHROMBOTIC EFFECTS OF FIBRIN-MONOMER IN EXPERIMENT WITH DOSED LIVER THERAPYhttps://orcid.org/0000-0002-8413-5484МомотА. П.MomotA. P.

Андрей Павлович МОМОТ – д.м.н., проф., директор, старший научный сотрудник лаборатории физиологии и патологии гемостаза и гемодинамики 

656045, Россия, г. Барнаул, ул. Ляпидевского, 1; 630117, Россия, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 4

Andrey Pavlovich Momot – doctor of medical sciences, professor, director 

656045, Barnaul, Lyapidevskogo str., 1;

630117, Novosibirsk, Timakov str., 4

xyzan@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-4606-3627ВдовинВ. М.VdovinV. M.

656038, Россия, г. Барнаул, просп. Ленина, 40; 

630117, Россия, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 4

Vyacheslav Mikhaylovich Vdovin – candidate of medical sciences, associate professor, head of the department of pathological physiology  

656038, Barnaul, Lenin av., 40; 630117, Novosibirsk, Timakov str., 4

erytrab@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-0979-8560ШахматовИ. И.ShakhmatovI. I.

Игорь Ильич ШАХМАТОВ – д.м.н., доцент, зав. кафедрой нормальной физиологии, старший научный сотрудник лаборатории физиологии и патологии гемостаза и гемодинамики

 

656038, Россия, г. Барнаул, просп. Ленина, 40; 

630117, Россия, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 4

Igor Ilyich Shakhmatov – doctor of medical sciences, professor, head of the department of normal physiology 

656038, Barnaul, Lenin av., 40; 630117, Novosibirsk, Timakov str., 4

iish59@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0001-5406-9191ТолстокоровИ. Г.TolstokorovI. G.

Игорь Геннадьевич ТОЛСТОКОРОВ – хирург

656006, Россия, г. Барнаул, ул. Балтийская, 4а

Igor Gennadievich Tolstokorov – surgeon

656006, Barnaul, Baltiyskaya str., 4a

igorka69@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0644-6313ОреховД. А.OrekhovD. A.

 

656055, Россия, г. Барнаул, ул. Малахова, 46

Dmitriy Andreevich Orekhov – surgeon

656055, Barnaul, Malakhov str., 46

orekhoffs@mail.ruhttps://orcid.org//0000-0002-3471-3426ШевченкоВ. О.ShevchenkoV. O.

Валентин Олегович ШЕВЧЕНКО – хирург

656006, Россия, г. Барнаул, ул. Балтийская, 4а

Valentin Olegovich Shevchenko – surgeon

656006, Barnaul, Baltiyskaya str., 4a

valentin_shevche@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6488-340XЛычёваН. А.LychevaN. A.

Наталья Александровна ЛЫЧЁВА – к.б.н., доцент кафедры нормальной физиологии, младший научный сотрудник лаборатории физиологии и патологии гемостаза и гемодинамики

656038, Россия, г. Барнаул, просп. Ленина, 40; 

630117, Россия, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 4

Natalya Alexandrovna Lycheva – candidate of biological sciences, associate professor of the department of normal physiology

656038, Barnaul, Lenin av., 40; 630117, Novosibirsk, Timakov str., 4

natalia.lycheva@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0967-6117КудиновА. В.KudinovA. V.

Алексей Владимирович КУДИНОВ – к.б.н., доцент кафедры фармакологии

656038, Россия, г. Барнаул, просп. Ленина, 40

Alexey Vladimirovich Kudinov– candidate of biological sciences, associate professor of the department of pharmacology 

656038, Barnaul, Lenin av., 40

kudinovalexej@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0001-8620-153XБелозерскаяГ. Г.BelozerskayaG. G.

 Галина Геннадьевна БЕЛОЗЕРСКАЯ – д.м.н., зав. лабораторией

125167, г. Москва, Новый Зыковский проезд, 4

Galina Gennadievna Belozerskaya – doctor of medical sciences, head of laboratory of pathology and pharmacology of hemostasis

125167, Moscow, Novyy Zykovsky dr., 4

belgalgen53@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-2683-3118КиселёвВ. И.KiselevV. I.

Валерий Иванович КИСЕЛЁВ – д.м.н., чл.-корр. РАН, проф. кафедры нормальной физиологии, зав. лабораторией, главный научный сотрудник лаборатории физиологии и патологии гемостаза и гемодинамики

656038, Россия, г. Барнаул, просп. Ленина, 40; 

630117, Россия, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 4

Valeriy Ivanovich Kiselev – corresponding member of RAS, doctor of medical sciences, professor of the department of normal physiology

656038, Barnaul, Lenin av., 40; 630117, Novosibirsk, Timakov str., 4

vik@agmu.ruНациональный медицинский исследовательский центр гематологии Минздрава России, Алтайский филиал; НИИ физиологии и фундаментальной медициныРоссияNational Research Center for Hematology of Minzdrav of Russia, Altai Branch; Research Institute of Physiology and Fundamental MedicineRussian FederationАлтайский государственный медицинский университет Минздрава России; НИИ физиологии и фундаментальной медициныРоссияAltai State Medical University of Minzdrav of Russia; Research Institute of Physiology and Fundamental MedicineRussian FederationООО КДЦ «Добрый доктор»РоссияConsulting Diagnostic Center «Dobryi Doktor» LtdRussian FederationАлтайский краевой кардиологический диспансерРоссияAltai Regional Cardiology Health CenterRussian FederationООО КДЦ «Добрый доктор»РоссияConsulting Diagnostic Center «Dobryi Doktor» Ltd.Russian FederationАлтайский государственный медицинский университет Минздрава РоссииРоссияAltai State Medical University of Minzdrav of RussiaRussian FederationНациональный медицинский исследовательский центр гематологии Минздрава РоссииРоссияNational Research Center for Hematology of Minzdrav of RussiaRussian Federation201901032019391612Copyright © Момот А.П., Вдовин В.М., Шахматов И.И., Толстокоров И.Г., Орехов Д.А., Шевченко В.О., Лычёва Н.А., Кудинов А.В., Белозерская Г.Г., Киселёв В.И., 20192019Момот А.П., Вдовин В.М., Шахматов И.И., Толстокоров И.Г., Орехов Д.А., Шевченко В.О., Лычёва Н.А., Кудинов А.В., Белозерская Г.Г., Киселёв В.И.Momot A.P., Vdovin V.M., Shakhmatov I.I., Tolstokorov I.G., Orekhov D.A., Shevchenko V.O., Lycheva N.A., Kudinov A.V., Belozerskaya G.G., Kiselev V.I.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://sibmed.elpub.ru/jour/article/view/97

Цель исследования – оценить системные гемостатические и протромботические эффекты фибрин-мономера (ФМ) при его внутривенном введении в эксперименте. 

Материал и методы

Материал и методы. В работе использовали 82 кролика-самца породы «Шиншилла» массой 3–4 кг. Наряду с плацебо животным внутривенно вводили водный раствор ФМ в дозах 0,1, 0,25, 0,5, 1,0, 2,5 и 5,0 мг/кг, через 1 ч наносили стандартную травму печени и оценивали кровопотерю (в % от объема циркулирующей крови), возникшую в результате паренхиматозного кровотечения. Исследование системы гемостаза включало в себя оценку числа тромбоцитов в венозной крови, уровней фибриногена и D-димера в плазме крови. 

Результаты и их обсуждение. Кровопотеря после дозированной травмы при введении плацебо составила 10,0 [4,0; 15,7] % объема циркулирующей крови (медиана [25-й процентиль; 75-й процентиль]). Введение ФМ в дозах 0,25, 2,5 и 5,0 мг/кг приводило к уменьшению кровопотери в 6,3 (р < 0,001), 7,8 (р < 0,001) и 2,7 раза (р = 0,04) (1,6 [1,0; 3,0], 1,3 [0,6; 1,6] и 3,7 [2,8; 5,5] % объема циркулирующей крови соответственно). В высоких дозах (2,5 и 5,0 мг/кг) ФМ минимизировал кровопотерю за счет активации коагуляционных свойств крови и тромбообразования, что иллюстрировалось 7–8-кратным ростом уровня D-димера (в сравнении с плацебо). Применение ФМ в дозе 0,25 мг/кг не сопровождалось увеличением содержания D-димера, хотя и многократно уменьшало кровопотерю. 

Заключение

Заключение. Полученные данные свидетельствуют о наличии у низкодозированного ФМ (0,25 мг/кг) уникальных гемостатических свойств, открывают возможности к созданию нового поколения гемостатических препаратов системного действия.

Objective of the study is to experimentally evaluate system hemostatic and prothrombotic effects of intravenous fibrin monomer (FM). 

Materials and methods

Materials and methods. Eighty two Chinchilla rabbits weighing 3–4 kg were used in the study. In addition to the placebo, animals were administered an aqueous solution of fibrin monomer (FM) intravenously at doses of 0.1, 0.25, 0.5, 1.0, 2.5 and 5.0 mg/kg. After 1 hour, a standard liver injury was performed and the blood loss (% of the circulating blood volume) resulting from parenchymal hemorrhage was estimated. Hemostatic system examination included platelet number in venous blood and fibrinogen and D-dimer levels in blood plasma. 

Results and discussion

Results and discussion. Blood loss after dosed injury with placebo was 10.0 [4.0; 15.7] % blood volume (median [25th percentile; 75th percentile]). FM preparation doses of 0.25, 2.5 and 5.0 mg/kg resulted in a decrease of blood loss by 6.3 (p < 0.001), 7.8 (p < 0.001) and 2.7 times (p = 0.04) (1.6 [1.0; 3.0], 1.3 [0.6; 1,6] and 3.7 [2.8; 5.3] % blood volume, respectively).High doses of FM preparation (2.5 and 5.0 mg/kg) minimized blood loss due to activation of coagulation and thrombus formation, which was illustrated by a 7.0–8.0-fold increase in D-dimer level (compared to placebo). 0.25 mg/kg of FM preparation did not lead to an increase of D-dimer content, although the blood loss was greatly reduced. 

Conclusion

Conclusion. The data obtained show the presence of unique hemostatic properties in low-dose FM preparation (0.25 mg/kg), which allows creating system hemostatic agents of a new generation.

система гемостазафибрин-мономертравма печенипаренхиматозное кровотечениегемостатический эффекткроликиhemostatic systemfibrin monomerliver injuryparenchymal hemorrhagehemostatic effectrabbitsReferencesБелицер В.А., Варецкая Т.В. Фибриноген и фибрин: строение молекул, самосборка волокон // Успехи соврем. биологии. 1975. 80. (1). 5–21.A guideline to experimental (preclinical) study of new pharmacological agents / Ed. R.Yu. Khabriev. Moscow: Meditsina, 2005. 832 p. [In Russian]Зубаиров Д.М. Молекулярные основы свертывания крови и тромбообразования. Казань: Фэн, 2000. 367 с.A guideline to preclinical drug studies. Part one / Ed. А.N. Mironov. М.: Grif i К, 2012. 944 p. [In Russian].Кудряшов Б.А., Молчанова Л.В., Калишевская Т.М., Базазьян Г.Г., Пасторова В.Е., Сытина Н.П. О функциональном состоянии противосвертывающей системы при внутривенном введении фибрин-мономера // Вопр. мед. химии. 1969. XV. (5). 483–486.Belitser V.A., Varetskaya T.V. Fibrinogen and fibrin: molecular structure, self-assembly of fibers. Uspekhi sovremennoy biologii = Biology Bulletin Reviews. 1975. 80. (1). 5–21. [In Russian].Луговской Э.В., Макогоненко Е.М., Комисаренко С.В. Молекулярные механизмы образования и разрушения фибрина: физико-химический и иммунохимический анализ. Киев: Наук. думка, 2013. 230 с.Damage Control Resuscitation at Level IIb/III Treatment Facilities / Joint Theater Trauma System Clinical Practice Guideline. Feb. 2013. 32 р.Макаров В.А., Белозерская Г.Г., Момот А.П., Соколов Э.А., Тер-Арутюнянц А.А., Васильева Т.М. Гемостатическое средство. Пат. 2308287 РФ; опубл. 20.10.2007.Dreijer A.R., Kruip M.J., Diepstraten J., Polinder S., Brouwer R., Leebeek F.W., Vulto A.G., Bemt P.M. Antithrombotic stewardship: a multidisciplinary team approach towards improving antithrombotic therapy outcomes during and after hospitalisation: a study protocol // BMJ Open. 2016. 6. (12). e011537.Момот А.П., Шахматов И.И., Ломаев И.С., Терехов С.С. Способ промышленного получения фибрин-мономера из плазмы крови. Пат. 2522237 РФ; опубл. 15.05.2014.European convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purposes. Strasburg: Council of Europe, 1986. 11 р.Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая / ред. А.Н. Миронов. М.: Гриф и К, 2012. 944 с.Kudryashov B.А., Molchanova L.V., Kalishevskaya T.M., Bazaz'yan G.G., Pastorova V.E., Sytina N.P. About the functional state of anticoagulant system in the setting of fibrin monomer intravenous administration // Problems of medical chemistry. 1969. XV. (5). 483-486. [In Russian].Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / ред. Р.Ю. Хабриев. М.: Медицина, 2005. 832 с.Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature. 1970. 227. (5259). 680-685.Справочник. Физиологические, биохимические и биометрические показатели нормы экспериментальных животных / ред. В.Г. Макаров. СПб.: ЛЕМА, 2013. 116 с.Levi M. Management of bleeding in patients treated with direct oral anticoagulants // Crit. Care. 2016. 20. 249.European convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purposes. Strasburg: Council of Europe, 1986. 11 р.Lugovskoj EH.V., Makogonenko E.M., Komisarenko S.V. Molecular mechanisms of fibrin formation and degradation: physicochemical and immunochemical analysis. Kiev: Naukova dumka, 2013. 230 p. [In Russian].Damage Control Resuscitation at Level IIb/III Treatment Facilities / Joint Theater Trauma System Clinical Practice Guideline. Feb. 2013. 32 р.Makarov V.А., Belozerskaya G.G., Momot А.P., Sokolov EH.А., Ter-Аrutyunyants А.А., Vasil'eva T.M. Hemostatic agent. Patent RF No. 2308287; published 20.10.2007. [In Russian].Dreijer A.R., Kruip M.J., Diepstraten J., Polin¬der S., Brouwer R., Leebeek F.W., Vulto A.G., Bemt P.M. Antithrombotic stewardship: a multidisciplinary team approach towards improving antithrombotic therapy outcomes during and after hospitalisation: a study protocol // BMJ Open. 2016. 6. (12). e011537.Momot А.P., SHakhmatov I.I., Lomaev I.S., Terekhov S.S. The method of fibrin monomer commercial production from blood plasma. Patent RF No. 2522237; published 15.05.2014. [In Russian].Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature. 1970. 227. (5259). 680–685.Putnam F.W. The Plasma Proteins. 2nd ed. Vol. 2. N.Y.: Acad. Press, 1975. 148 p.Levi M. Management of bleeding in patients treated with direct oral anticoagulants // Crit. Care. 2016. 20. 249.Reference Book. Physiological, biochemical and biometric indicators of normal values for experimental animals / Ed. V.G. Makarov. Saint-Petersburg: LEMA, 2013. 116 p. [In Russian].Putnam F.W. The Plasma Proteins. 2nd ed. Vol. 2. N.Y.: Acad. Press, 1975. 148 p.Rossaint R., Bouillon B., Cerny V., Coats T.J., Duranteau J., Fernández-Mondéjar E., Filipescu D., Hunt B.J., Komadina R., Nardi G., Neugebauer E.A., Ozier Y., Riddez L., Schultz A., Vincent J.L., Spahn D.R. The European guideline on management of major bleeding and coagulopathy following trauma: fourth edition // Crit. Care. 2016.12. (20). 100.Rossaint R., Bouillon B., Cerny V., Coats T.J., Duranteau J., Fernández-Mondéjar E., Filipescu D., Hunt B.J., Komadina R., Nardi G., Neugebauer E.A., Ozier Y., Riddez L., Schultz A., Vincent J.L., Spahn D.R. The European guideline on management of major bleeding and coagulopathy following trauma: fourth edition // Crit. Care. 2016.12. (20). 100.Soe G.L., Kohno I., Inuzuka K., Itoh Y., Matsuda M. A monoclonal antibody that recognizes a neo-antigen exposed in the E domain of fibrin monomer complexed with fibrinogen or its derivatives: its application to the measurement of soluble fibrin in plasma // Blood. 1996. 188. (6). 2109-2117.Soe G.L., Kohno I., Inuzuka K., Itoh Y., Matsu¬da M. A monoclonal antibody that recognizes a neo-antigen exposed in the E domain of fibrin monomer complexed with fibrinogen or its derivatives: its application to the measurement of soluble fibrin in plasma // Blood. 1996. 188. (6). 2109–2117.Zubairov D.M. Molecular basis of blood clotting and thrombogenesis. Kazan': Fen, 2000. 367 p. [In Russian].

The authors declare that there are no conflicts of interest present.