sibmedСибирский научный медицинский журналСибирский научный медицинский журнал2410-25122410-2520ИЦиГ СО РАН10.18699/SSMJ20210305sibmed-601Research ArticleМЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИBIOMEDICINEАнализ дифференцировки периферических B-лимфоцитов у женщин с угрожающим самопроизвольным выкидышем и привычным невынашиванием беременности в анамнезеAnalysis of the differentiation of peripheral B-lymphocytes in pregnant women with a habitual miscarriagehttps://orcid.org/0000-0002-0608-0692СотниковаН. Ю.SotnikovaN. Yu.

Наталья Юрьевна Сотникова - доктор медицинских наук, профессор.

153045, Иваново, ул. Победы, 20

Natalia Yu. Sotnikova - doctor of medical sciences, professor.

153045, Ivanovo, Pobedy str., 20

niimid.immune@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1145-0563МалышкинаА. И.MalyshkinaA. I.

Анна Ивановна Малышкина - доктор медицинских наук, профессор.

153045, Иваново, ул. Победы, 20

Anna I. Malyshkina - doctor of medical sciences, professor.

153045, Ivanovo, Pobedy str., 20

anna_im@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1355-7225КустА. В.KustA. V.

Алена Валерьевна Куст

153045, Иваново, ул. Победы, 20

Alena V. Kust

153045, Ivanovo, Pobedy str., 20

avkMD@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0003-2836-8694ВоронинД. Н.VoroninD. N.

Дмитрий Николаевич Воронин - кандидат биологических наук.

153045, Иваново, ул. Победы, 20

Dmitriy N. Voronin - candidate of biological sciences.

153045, Ivanovo, Pobedy str., 20

niimid.immune@mail.ruИвановский НИИ материнства и детства имени В.Н. Городкова Минздрава РоссииРоссияIvanovsky Research Institute of Motherhood and Childhood n.a. V.N. Gorodkov of Minzdrav of RussiaRussian Federation2021160620214133844Copyright © Сотникова Н.Ю., Малышкина А.И., Куст А.В., Воронин Д.Н., 20212021Сотникова Н.Ю., Малышкина А.И., Куст А.В., Воронин Д.Н.Sotnikova N.Y., Malyshkina A.I., Kust A.V., Voronin D.N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://sibmed.elpub.ru/jour/article/view/601

Частота привычного выкидыша среди всех желанных беременностей составляет 2-5 %. Доказана важная роль иммунных нарушений в досрочном прерывании беременности. Уточнение характера дифференцировки В-лимфоцитов у женщин с угрожающим выкидышем и привычным невынашиванием беременности в анамнезе является актуальной проблемой, поскольку позволит выявить иммунные механизмы патогенеза данной патологии. Цель исследования - оценить характер дифференцировки и особенности цитокин-продуцирующей функции периферических В-лимфоцитов у женщин с угрожающим самопроизвольным выкидышем и привычным невынашиванием беременности в анамнезе.

Материал и методы. Обследованы беременные в возрасте 18-40 лет в сроке гестации 5-12 недель. Основную группу составили 60 женщин с угрожающим самопроизвольным выкидышем на момент обследования и привычным невынашиванием в анамнезе. В качестве контроля обследовано 35 женщин с неосложненным течением беременности. Группу сравнения составили 25 первобеременных с угрожающим самопроизвольным выкидышем на момент обследования. Материалом исследования служила периферическая венозная кровь. Методом проточной цитофлуориметрии определяли субпопуляции В-лимфоцитов CD20+CD5+, CD20+CD5-, CD19+IgD+, CD20+IgM+, CD20+IgG+; CD19+CD20-CD38+, CD19+CD27-, CD19+CD27+, CD19+IgD+CD27+, CD19+IgD+CD27-, CD20+IL-4+, CD20+IL-6+, CD20+IL-10+.

Результаты и их обсуждение. В основной группе зарегистрировано увеличение в периферической крови доли В-клеток, преимущественно за счет В2-лимфоцитов, лимфоцитов CD20+IgM+ и клеток памяти, наряду со снижением количества наивных клеток и плазмоцитов, а также лимфоцитов, экспрессирующих IL-6 и IL-10. Таким образом, угрожающий привычный выкидыш был ассоциирован со сдвигом дифференцировки В-лимфоцитов в сторону незрелых форм. Уменьшение числа клеток CD20+IL-10+ у пациенток основной группы может привести к ослаблению супрессорного влияния, связанного с IL-10, и последующему нарушению толерантности материнского организма к полуаллогенному плоду. Подобные изменения дифференцировки и функциональной активности В-лимфоцитов наблюдались и при угрожающей потере первой беременности, что может свидетельствовать о едином механизме развития угрожающего самопроизвольного выкидыша, выраженность которого увеличивается при повторной потере беременности.

The frequency of recurrent miscarriage among all desired pregnancies is 2-5 %. The important role of immune disorders in early termination of pregnancy has been proven. Elucidation of the nature of differentiation of B-lymphocytes in women with threatened miscarriage and habitual miscarriage in the anamnesis seems relevant, since it will clarify the immune mechanisms of the pathogenesis of this pathology. Aim of the study was to assess the nature of differentiation and type of the cytokine-producing function of peripheral B lymphocytes in women with a threatening spontaneous miscarriage and recurrent miscarriage in history.

Material and methods

Material and methods. Pregnant women aged 18-40 years at a gestation period of 5-12 weeks were examined. The main group consisted of 60 pregnant women with a threatening spontaneous abortion at the time of the examination and a history of recurrent abortion. 35 pregnant women with uncomplicated pregnancy were examined as a control group. The comparison group consisted of 25 primary pregnant women with threatened spontaneous abortion at the time of the examination. The material for the study was peripheral venous blood. Subpopulations of B lymphocytes CD20+CD5+, CD20+CD5-, CD19+IgD+, CD20+IgM+, CD20+IgG+; CD19+CD20-CD38+, CD19+CD27-, CD19+CD27+, CD19+IgD+CD27+, CD19+IgD+CD27-, CD20+IL-4+, CD20+IL-6+, CD20+IL-10+ were determined by the method of flow cytometry.

Results and discussion

Results and discussion. In the main group, an increase in the proportion of B cells in the peripheral blood was recorded, mainly due to B2 lymphocytes, CD20 +IgM+ lymphocytes and memory cells, along with a decrease in the level of naive cells and plasma cells, as well as lymphocytes spontaneously expressing IL-6 and IL-10. Thus, the threatening habitual miscarriage is associated with a shift in B-lymphocyte differentiation towards immature forms. A decrease in the number of CD20+IL-10+ cells in patients of the main group can lead to a weakening of the suppressor associated with IL-10 and subsequent impairment of the maternal organism’s tolerance to a semi-allogeneic fetus. Similar changes in the differentiation and functional activity of B-lymphocytes were also observed with a threatening loss of the first pregnancy, which may indicate a single mechanism for the development of a threatening spontaneous miscarriage, the severity of which increases with repeated loss of pregnancy.

беременностьпривычное невынашиваниеугроза прерыванияВ-лимфоцитыцитокиныpregnancyrecurrent miscarriagethreat of interruptionB-lymphocytescytokinesReferencesМаркова Ж.Г., Мусатова Е.В., Тарлычева А.А., Шилова Н.В. Эффективная диагностика хромосомных аномалий при невынашивании беременности. Соврем. пробл. науки и образ. 2016; (5) : 321.Markova Zh.G., Musatova E.V., Tarlycheva A.A., Shilova N.V. Effective diagnosis of chromosomal abnormalities in miscarriage. Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya = Modern Problems of Science and Education. 2016; (5): 321. [In Russian]Борзова Н.Ю., Иваненкова Н.И., Малышки-на А.И. Привычный выкидыш: новые подходы в лечении. Рос. вестн. акушера-гинеколога. 2016; 16 (5): 42-45. doi: 10.17116/rosakush201616542-45Borzova N.Yu., Ivanenkova N.I., Malyshkina A.I. Recurrent miscarriage: New approaches to treatment. Rossiyskiy vestnik akushera-ginekologa = Russian Bulletin of Obstetrician Gynecologist. 2016; 16 (5): 42-45. [In Russian]. doi: 10.17116/rosakush201616542-45Сотникова Н.Ю., Малышкина А.И., Крошкина Н.В., Батрак Н.В. Особенности регуляции Fas-зависимого апоптоза при привычном невынашивании беременности ранних сроков. Рос. иммунол. ж. 2017; 11 (3): 510-512.Sotnikova N.Yu., Malyshkina A.I., Kroshkina N.V., Batrak N.V. The regulation of fas-dependent apoptosis in rsa pregnancy. Rossiyskiy immunologichesky zhurnal = Russian Journal of Immunology. 2017; 11 (3): 510— 512. [In Russian].Агнаева А.О., Беспалова О.Н., Соколов Д.И., Сельков С.А., Коган И.Ю. Роль естественных киллеров (NK-клеток) в репродуктивных потерях. Ж. акушерства и жен. болезней. 2017; 66 (3): 143-156. doi: 10.17816/JOWD663143-156Agnaeva A.O., Bespalova O.N., Sokolov D.I., Sel’kov S.A., Kogan I.Ju. Role of natural killer cells in reproductive failure. Zhurnal akusherstva i zhenskikh bolezney= Journal of Obstetrics and Women’s Diseases. 2017; 66 (3): 143-156. [In Russian]. doi: 10.17816/JOWD663143-156Wang Y., Liu J., Burrows P.D., Wang J.Y. B cell development and maturation. Adv. Exp. Med. Biol. 2020; 1254: 1-22. doi: 10.1007/978-981-15-3532-1_1.Wang Y., Liu J., Burrows P.D., Wang J.Y. B cell development and maturation. Adv. Exp. Med. Biol. 2020; 1254: 1-22. doi: 10.1007/978-981-15-3532-1_1.Danaii S., Ghorbani F., Ahmadi M., Abbasza-deh H., Koushaeian L., Soltani-Zangbar M.S., Meh-dizadeh A., Hojjat-Farsangi M., Kafil H.S., Agheba-ti-Maleki L., Yousefi M. IL-10-producing B cells play important role in the pathogenesis of recurrent pregnancy loss. Int. Immunopharmacol. 2020; 87: 106806. doi: 10.1016/j.intimp.2020.106806Danaii S., Ghorbani F., Ahmadi M., Abbasza-deh H., Koushaeian L., Soltani-Zangbar M.S., Meh-dizadeh A., Hojjat-Farsangi M., Kafil H.S., Agheba-ti-Maleki L., Yousefi M. IL-10-producing B cells play important role in the pathogenesis of recurrent pregnancy loss. Int. Immunopharmacol. 2020; 87: 106806. doi: 10.1016/j.intimp.2020.106806Darmochwal-Kolarz D., Leszczynska-Gor-zelak B., Rolinski J., Oleszczuk J. The immunopheno-type of patients with recurrent pregnancy loss. Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. 2002; 103 (1): 53-57. doi: 10.1016/s0301-2115(02)00025-8Darmochwal-Kolarz D., Leszczynska-Gorzelak B., Rolinski J., Oleszczuk J. The immunopheno-type of patients with recurrent pregnancy loss. Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. 2002; 103 (1): 53-57. doi: 10.1016/s0301-2115(02)00025-8Borhis G., Richard Y. Subversion of the B-cell compartment during parasitic, bacterial, and viral infections. BMC Immunol. 2015; 16: 15. doi: 10.1186/s12865-015-0079-yBorhis G., Richard Y. Subversion of the B-cell compartment during parasitic, bacterial, and viral infections. BMC Immunol. 2015; 16: 15. doi: 10.1186/s12865-015-0079-yLiu L., Tan Q., Hu B., Wu H., Wang C., Liu R., Tang C. Somatostatin improved B Cells mature in macaques during intestinal ischemia-reperfusion. PLoS One. 2015; 10 (7): e0133692. doi: 10.1371/journal.pone.0133692Liu L., Tan Q., Hu B., Wu H., Wang C., Liu R., Tang C. Somatostatin improved B Cells mature in macaques during intestinal ischemia-reperfusion. PLoS One. 2015; 10 (7): e0133692. doi: 10.1371/journal.pone.0133692Mai'ga R.I., Bonnaure G., Rochette J.T., Neron S. Human CD38hiCD138+ plasma cells can be generated in vitro from CD40-activated switched-mem-ory B lymphocytes. J. Immunol. Res. 2014; 2014: 635108. doi: 10.1155/2014/635108Mai'ga R.I., Bonnaure G., Rochette J.T., Neron S. Human CD38hiCD138+ plasma cells can be generated in vitro from CD40-activated switched-mem-ory B lymphocytes. J. Immunol. Res. 2014; 2014: 635108. doi: 10.1155/2014/635108Khan W.N., Wright J.A., Kleiman E., Boucher J.C., Castro I., Clark E.S. B-lymphocyte tolerance and effector function in immunity and autoimmunity. Immunol. Res. 2013; 57 (1-3): 335-353. doi: 10.1007/s12026-013-8466-zKhan W.N., Wright J.A., Kleiman E., Boucher J.C., Castro I., Clark E.S. B-lymphocyte tolerance and effector function in immunity and autoimmunity. Immunol. Res. 2013; 57 (1-3): 335-353. doi: 10.1007/s12026-013-8466-zTorigoe M., Iwata S., Nakayamada S., Sakata K., Zhang M., Hajime M., Miyazaki Y., Narisawa M., Ishii K., Shibata H., Tanaka Y. Metabolic reprogramming commits differentiation of human CD27+IgD+ B cells to plasmablasts or CD27-IgD- cells. J. Immunol. 2017; 199 (2): 425-434. doi: 10.4049/jimmu-nol.1601908Torigoe M., Iwata S., Nakayamada S., Sakata K., Zhang M., Hajime M., Miyazaki Y., Narisawa M., Ishii K., Shibata H., Tanaka Y. Metabolic reprogramming commits differentiation of human CD27+IgD+ B cells to plasmablasts or CD27-IgD- cells. J. Immunol. 2017; 199 (2): 425-434. doi: 10.4049/jimmu-nol.1601908Лушова А.А., Жеремян Э.А., Астахова Е.А., Спиридонова А.Б., Бязрова М.Г., Филатов А.В. Субпопуляции В-лимфоцитов: функции и молекулярные маркеры. Иммунология. 2019; 40 (6): 63-76. doi: 10.24411/02064952-2019-16009Lushova A.A., Zheremyan E.A., Astakhova E.A., Spiridonova A.B., Byazrova M.G., Filatov A.V. B-lym-phocyte subsets: functions and molecular markers. Im-munologija = Immunology. 2019; 40 (6): 63-76. [In Russian]. doi: 10.24411/02064952-2019-16009Justiz Vaillant A.A., Qurie A. Interleukin. In: StatPearls [Internet]. StatPearls Publishing; 2021.Justiz Vaillant A.A., Qurie A. Interleukin. In: StatPearls [Internet]. StatPearls Publishing; 2021.Moens L., Tangye S.G. Cytokine-mediated regulation of plasma cell generation: IL-21 takes center stage. Front. Immunol. 2014; 5: 65. doi: 10.3389/fim-mu.2014.00065Moens L., Tangye S.G. Cytokine-mediated regulation of plasma cell generation: IL-21 takes center stage. Front. Immunol. 2014; 5: 65. doi: 10.3389/fim-mu.2014.00065Hosseini A., Dolati S., Hashemi V, Abdollah-pour-Alitappeh M., Yousefi M. Regulatory T and T helper 17 cells: Their roles in preeclampsia. J. Cell. Physiol. 2018; 233 (9): 6561-6573. doi: 10.1002/jcp.26604Hosseini A., Dolati S., Hashemi V, Abdollah-pour-Alitappeh M., Yousefi M. Regulatory T and T helper 17 cells: Their roles in preeclampsia. J. Cell. Physiol. 2018; 233 (9): 6561-6573. doi: 10.1002/jcp.26604Furuzawa-Carballeda J., Hernandez-Molina G., Lima G., Rivera-Vicencio Y., Ferez-Blando K., Llorente L. Peripheral regulatory cells immunophenotyping in primary Sjogren’s syndrome: a cross-sectional study. Arthritis Res. Ther. 2013; 15 (3): R68. doi: 10.1186/ar4245Furuzawa-Carballeda J., Hernandez-Molina G., Lima G., Rivera-Vicencio Y., Ferez-Blando K., Lloren-te L. Peripheral regulatory cells immunophenotyping in primary Sjogren’s syndrome: a cross-sectional study. Arthritis Res. Ther. 2013; 15 (3): R68. doi: 10.1186/ar4245Камилова М.Я., Рахматуллоева ДМ., Арабова С.У Изменения плацентарных гормонов и маркеров апоптоза у женщин с угрозой прерывания беременности и отягощенным невынашиванием беременности. Sciences of Europe. 2017; 1 (14): 45-48.Kamilova M., Rahmatulloeva D.M., Arabova S.U. Changes of placental hormones and apoptosis markers in women with the threat of abortion and aggravated miscarriages. Sciences of Europe. 2017; 1 (14): 45-48. [In Russian].Rolle L., Memarzadeh Tehran M., Mo-rell-Garcia A., Raeva Y., Schumacher A., Hartig R., Costa S.D., Jensen F., Zenclussen A.C. Cutting edge: IL-10-producing regulatory B cells in early human pregnancy. Am. J. Reprod. Immunol. 2013; 70 (6): 448453. doi: 10.1111/aji.12157Rolle L., Memarzadeh Tehran M., Morell-Garcia A., Raeva Y., Schumacher A., Hartig R., Costa S.D., Jensen F., Zenclussen A.C. Cutting edge: IL-10-producing regulatory B cells in early human pregnancy. Am. J. Reprod. Immunol. 2013; 70 (6): 448453. doi: 10.1111/aji.12157Esteve-Sole A., Luo Y., Vlagea A., Deya-Martinez A., Yagtie J., Plaza-Martin A.M., Juan M., Alsina L. B regulatory cells: players in pregnancy and early life. Int. J. Mol. Sci. 2018; 19 (7): 2099. doi: 10.3390/ijms190720Esteve-Sole A., Luo Y., Vlagea A., Deya-Martinez A., Yagtie J., Plaza-Martin A.M., Juan M., Alsina L. B regulatory cells: players in pregnancy and early life. Int. J. Mol. Sci. 2018; 19 (7): 2099. doi: 10.3390/ijms190720

The authors declare that there are no conflicts of interest present.