Лыков Александр Петрович, д.м.н.
630060, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 2
Alexandr P. Lykov, doctor of medical sciences
630060, Novosibirsk, Timakova st., 2
Горячкин Александр Михайлович
630091, г. Новосибирск, Красный пр., 52
Alexandr M. Goryachkin
630091, Novosibirsk, Krasny ave., 52
Пуртов Алексей Анатольевич
630559, Новосибирская обл., р.п. Кольцово, пр. Академика Сандахчиева, 13
Alexei A. Purtov
630559, Novosibirsk region, Koltsovo, Akademika Sandakhchieva ave., 13
Дровосеков Михаил Николаевич, д.м.н.
630091, г. Новосибирск, Красный пр., 52
Mikhail N. Drovosekov, doctor of medical sciences
630091, Novosibirsk, Krasny ave., 52
Агеева Татьяна Августовна, д.м.н., проф.
630091, г. Новосибирск, Красный пр., 52
Tatyana A. Ageeva, doctor of medical sciences, professor
630091, Novosibirsk, Krasny ave., 52
Надеев Александр Петрович, д.м.н., проф.
630091, г. Новосибирск, Красный пр., 52
Alexandr P. Nadeev, doctor of medical sciences, professor
630091, Novosibirsk, Krasny ave., 52
Юрина Наталья Владимировна
630091, г. Новосибирск, Красный пр., 52
Natalya V. Yurina
630091, Novosibirsk, Krasny ave., 52
Жураковский Игорь Павлович, д.м.н.
630091, г. Новосибирск, Красный пр., 52
Igor P. Zhurakovsky, doctor of medical sciencess
630091, Novosibirsk, Krasny ave., 52
Повещенко Ольга Владимировна, д.м.н.
630060, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 2
Olga V. Poveshchenko, doctor of medical sciences
630060, Novosibirsk, Timakova st., 2
Заживление ожоговой раны кожи – это длительный и комплексный процесс, в котором активную роль играют как клеточные элементы самой кожи, так и биологически активные молекулы, включая цитокины. Одной из таких молекул является ангиогенин, представляющий собой рибонуклеазу, которая способствует формированию сосудистой сети в области повреждения органов и тканей. Целью исследования стало сравнительное изучение эффекта внутрикожного введения рекомбинатного ангиогенина человека, кондиционированных сред от мезенхимных стволовых клеток костного мозга человека, клеток эндотелиальной линии EA.Hy926 и клеток линии фибробластов кожи человека при термическом ожоге кожи у самок мышей линии CD-1.
Материал и методы. Термический ожог кожи в области спины инициировали прижиганием металлической пластиной, нагретой над пламенем спиртовки до 200–250 °С. Лечение начинали сразу же после инициации ожоговой раны. Рекомбинантный ангиогенин человека (1 мл раствора, содержащего 10 мкг действующего агента) вводили одно-, двухи трехкратно с интервалом 7 суток, кондиционированные среды от соматических клеток человека (1 мл) ‒ однократно. На 7-е, 14-е и 21-е сутки измеряли размер раны штангенциркулем, после выведения животных из эксперимента забирали кровь и фрагмент кожи с ожоговой раной. В сыворотке крови и экстракте образцов кожи определяли уровень цитокинов (IL-1β, TNFα, IL-10, VEGF) и NO спектрофотометрически. При гистологическом анализе образцов кожи оценивали плоский эпителий, грануляционную ткань, количество кровеносных сосудов, лимфоцитов, макрофагов, нейтрофилов, плазмоцитов и фибробластов.
Результаты и их обсуждение. В группах мышей с термическим ожогом, получавших лечение рекомбинантным ангиогенином человека или кондиционированными средами от соматических клеток человека, выявлено значимое ускорение заживления раневого дефекта кожи. Эффективность однократного введения рекомбинантного ангиогенина человека сопоставима с эффективностью кондиционированной среды от мезенхимных стволовых клеток костного мозга человека. Лечение рекомбинантным ангиогенином человека и кондиционированными средами от соматических клеток человека способствовало эпителизации раневого дефекта, формированию грануляционной ткани и усилению ангиогенеза раневого дефекта. Показано, что уровни цитокинов и NO в сыворотке крови и коже меняются в зависимости как от вида лечения, так и от срока наблюдений. Между данными параметрами и морфометрическими показателями образцов кожи из области ожога выявлены корреляционные связи.
Заключение. Инъекции биомедицинского клеточного продукта в область термического ожога кожи у самок мышей линии CD-1 ускоряют заживление раневого дефекта.
Both the skin's own cellular components and physiologically active substances, such as cytokines, actively participate in the protracted and intricate process of skin burn wound healing. One of these molecules is angiogenin, a ribonuclease that encourages the development of a vascular network where tissue and organ damage has occurred. The study compared the effects of intradermal delivery of human skin fibroblast cells, EA.Hy926 endothelial cells, conditioned media from human bone marrow mesenchymal stem cells, and human recombinant angiogenin after thermal skin burn in female CD-1 mice.
Material and methods. Using a metal plate heated to 200–250 °C over the flame, a thermal skin burn in the back area was initiated. Treatment was started immediately after the initiation of the burn wound. Recombinant human angiogenin (1 ml of solution containing 10 μg of active agent) was administered once, twice, and three times with an interval of 7 days; conditioned media from human somatic cells (1 ml) were administered once. A caliper was used to measure the size of the wound on days 7, 14, and 21. Blood and a piece of skin from the burn wound were collected when the animals were removed from the experiment. Using spectrophotometry, the amounts of NO and cytokines (IL-1β, TNFα, IL-10, and VEGF) in blood serum and extract of skin samples were measured. The squamous epithelium, granulation tissue, blood vessel count, lymphocytes, neutrophils, macrophages, plasmocytes, and fibroblasts were all evaluated by histological analysis of skin samples.
Results and discussion. Human recombinant angiogenin or conditioned media derived from human somatic cells significantly accelerated the repair of wound skin defects in groups of mice with thermal burns. A conditioned media derived from human bone marrow mesenchymal stem cells is as effective as a single injection of human recombinant angiogenin. The wound defect's epithelialization, granulation tissue development, and increased angiogenesis were all facilitated by treatment with human recombinant angiogenin and conditioned media derived from human somatic cells. It has been demonstrated that variations in cytokine and NO levels in blood serum and skin occur depending on the type of treatment and the length of observation. The morphometric characteristics of skin samples taken from the burn site were found to correlate with these parameters.
Conclusions. Injections of the biomedical cell product into the area of thermal skin burns in female CD-1 mice accelerate wound defect healing.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.