sibmedСибирский научный медицинский журналСибирский научный медицинский журнал2410-25122410-2520ИЦиГ СО РАН10.18699/SSMJ20230512sibmed-1249Research ArticleМЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИBIOMEDICINEИсследование иммунотоксических свойств пегилированной гиалуронидазыStudy of the immunotoxic properties of pegylated hyaluronidasehttps://orcid.org/0000-0003-4139-036XЕршовК. И.ErshovK. I.

к.м.н.

630091, г. Новосибирск, Красный пр., 5

630117, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 2

candidate of medical sciences

630091, Novosibirsk, Krasny ave., 52630060, Novosibirsk, Timakova st., 2

ershov_k@bk.ruhttps://orcid.org/0009-0002-7735-6032ШвецоваА. М.ShvetsovaA. M.

630117, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 2

630060, Novosibirsk, Timakova st., 2

aleksa-2904@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6178-5329ШерстобоевЕ. Ю.SherstoboevE. Yu.

д.м.н., проф.

634028, г. Томск, пр. Ленина, 3

doctor of medical sciences, professor

634028, Tomsk, Lenina ave., 3

sherstoboev_eu@pharmso.ruЧуринА. А.ChurinA. A.

д.м.н.

634028, г. Томск, пр. Ленина, 3

doctor of medical sciences

634028, Tomsk, Lenina ave., 3

churin_aa@pharmso.ruЖдановВ. В.ZhdanovV. V.

д.м.н., проф., чл.-корр. РАН

634028, г. Томск, пр. Ленина, 3

doctor of medical sciences, professor, corresponding member of RAS

634028, Tomsk, Lenina ave., 3

zhdanov_vv@pharmso.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0471-652XКоролевМ. А.KorolevM. A.

д.м.н.

630117, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 2

doctor of medical sciences

630060, Novosibirsk, Timakova st., 2

kormax@bk.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1093-8938МадоновП. Г.MadonovP. G.

д.м.н.

630091, г. Новосибирск, Красный пр., 5

630117, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 2

doctor of medical sciences

630091, Novosibirsk, Krasny ave., 52630060, Novosibirsk, Timakova st., 2

pmadonov@yandex.ruНовосибирский государственный медицинский университет Минздрава России; НИИ клинической и экспериментальной лимфологии – филиал ФИЦ Институт цитологии и генетики СО РАНРоссияNovosibirsk State Medical University of Minzdrav of Russia; Research Institute of Clinical and Experimental Lymphology – Branch of the Federal Research Center Institute of Cytology and Genetics SB RASRussian FederationНИИ клинической и экспериментальной лимфологии – филиал ФИЦ Институт цитологии и генетики СО РАНРоссияResearch Institute of Clinical and Experimental Lymphology – Branch of the Federal Research Center Institute of Cytology and Genetics SB RASRussian FederationНИИ фармакологии и регенеративной медицины имени Е.Д. Гольдберга Томского национального исследовательского медицинского центра РАНРоссияResearch Institute of Pharmacology and Regenerative Medicine E.D. Goldberg Tomsk National Research Medical Center of the Russian Academy of SciencesRussian Federation202330102023435118126Copyright © Ершов К.И., Швецова А.М., Шерстобоев Е.Ю., Чурин А.А., Жданов В.В., Королев М.А., Мадонов П.Г., 20232023Ершов К.И., Швецова А.М., Шерстобоев Е.Ю., Чурин А.А., Жданов В.В., Королев М.А., Мадонов П.Г.Ershov K.I., Shvetsova A.M., Sherstoboev E.Y., Churin A.A., Zhdanov V.V., Korolev M.A., Madonov P.G.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://sibmed.elpub.ru/jour/article/view/1249

Разработка безопасных лекарственных средств занимает особое место в фарминдустрии. Одной из основных задач ее доклинического этапа является оценка возможного токсического действия разрабатываемого препарата на организм и на различные системы, в том числе иммунную. Целью работы было изучить иммунотоксические свойства пегилированной гиалуронидазы (ПЭГ-ГИАЛ). Материал и методы. Мышей F1(CBA/C57Bl/6) разделили на подгруппы, которым вводили ПЭГ-ГИАЛ внутрижелудочно и внутрибрюшинно в разных дозах (50, 500, 1250, 2500 и 5000 ЕД/кг). У животных определяли количество антителообразующих клеток в селезенке, массу и клеточность центральных и периферических органов иммунитета, фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов и нейтрофилов, реакцию гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ), уровень гемагглютининов к эритроцитам барана, спонтанную и индуцированную митогенами пролиферацию спленоцитов. Результаты. ПЭГ-ГИАЛ не индуцировала ГЗТ, не подавляла фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов, в дозе 50 ЕД/кг не влияла существенно на содержание гемагглютининов к эритроцитам, однако в дозе 500 ЕД/кг статистически значимо снижала титр специфических антител. При воздействии ПЭГ-ГИАЛ в дозе 50 и 500 ЕД/кг у подопытных животных уменьшалась спонтанная и индуцированная митогенами пролиферация спленоцитов. Заключение. В ходе проведенного эксперимента по введению ПЭГ-ГИАЛ мышам получены результаты, которые можно использовать для обоснования возможности применения лекарственного препарата на основе ПЭГ-ГИАЛ.

The development of safe drugs occupies a special place in the pharmaceutical industry. One of the main tasks of its preclinical phase is to evaluate possible toxic effects of the developed drug on the body and on various systems, including the immune system. The aim of our work was to study immunotoxic properties of pegylated hyaluronidase (PEG- HYAL). Material and methods. Mice F1(CBA/C57Bl/6) were divided into subgroups which were intragastric and intraperitoneally administered with PEG-HYAL in different dosages (50, 500, 1250, 2500 and 5000 U/kg). The number of antibody-producing cells in the spleen, the mass and cellularity of central and peripheral immune organs, phagocytic activity of peritoneal macrophages and neutrophils, delayed hypersensitivity reaction (DHR), level of hemagglutinin to sheep erythrocytes, spontaneous and mitogen-induced splenocyte proliferation were determined. Results. PEG-HYAL did not induce DHR, did not suppress phagocyte activity of peritoneal macrophages, at a dose of 50 ED/kg did not significantly affect the hemagglutinin content to erythrocytes, but at a dose of 500 ED/kg did statistically significantly reduce the titer of specific antibodies. When experimental animals were exposed to PEG-HYAL at doses of 50 and 500 U/kg, spontaneous and mitogen-induced proliferation of splenocytes decreased. Conclusions. The PEG-HYAL trial produced results that can be used to substantiate the administration of the PEG-HYAL-based medication.

пегилированная гиалуронидазаиммунотоксические свойстваpegylated hyaluronidaseimmunotoxic propertiesReferencesЗабанова В.Е., Фурсова А.Ж., Мадонов П.Г. Фармакологические свойства гиалуронидазы и возможности ее клинического применения в офтальмологии. Сиб. науч. мед. ж. 2020;40(4):11– 19. doi: 10.15372/SSMJ20200402Zabanova V.E., Fursova A.J., Madonov P.G. Hyaluronidase pharmacological properties and clinical application in ophthalmology. Sibirskij nauchnyj medicinskij zhurnal = Siberian Scientific Medical Journal. 2020;40(4):11–19. [In Russian]. doi: 10.15372/SSMJ20200402Дыгай А.М., Зюзьков Г.Н., Жданов В.В., Верещагин Е.И. Регуляция функций прогениторных клеток с помощью гиалуронидазы. Вестн. РАМН. 2009;(11):6–9.Dygai A.M., Zyuzkov G.N., Zhdanov V.V., Vereshchagin E.I. Regulation of progenitor cell functions by hyaluronidase. Vestnik Rossiyskoy akademii meditsinskikh nauk = Annals of the Russian Academy of Medical Sciences. 2009;(11):6–9. [In Russian].Дыгай А.М., Першина О.В., Крупин В.А., Ермолаева Л.А., Ермакова Н.Н., Шилова М.А., Мадонов П.Г., Киншт Д.Н., Скурихин Е.Г. Изучение антифибротической активности модифицированной и нативной гиалуронидазы при пневмофиброзе. Сиб. науч. мед. ж. 2017;37(4):5–10.Dygai A.M., Pershina O.V., Krupin V.A., Ermolaeva L.A., Ermakova N.N., Shilova M.A., Madonov P.G., Kinsht D.N., Skurikhin E.G. Study of antifibrotic activity of modified and native hyaluronidase in pneumofibrosis. Sibirskij nauchnyj medicinskij zhurnal = Siberian Scientific Medical Journal. 2017;37(4):5–10. [In Russian].Инструкция по медицинскому применению лекарственного препарата Лонгидаза. Регистрационное удостоверение ЛС-000764-220818. Режим доступа: https://petrovax.ru/upload/instructions/20180822_longidaza_IMP.pdfInstructions for medical use of the medicine Longidaza. Registration certificate LS-000764-220818. Available at: https://petrovax.ru/upload/instructions/20180822_longidaza_IMP.pdf [In Russian].Мадонов П.Г., Ершов К.И., Дубровин А.В., Заполоцкий Е.Н., Мирошников П.Н., Шилова М.А., Киншт Д.Н. Электронно-лучевая модификация препаратов белковой природы для улучшения их фармакологических свойств. Мед. и образ. в Сибири. 2013;(4):83.Madonov P.G., Ershov K.I., Dubrovin A.V., Zapolotsky E.N., Miroshnikov P.N., Shilova M.A., Kinsht D.N. Electron-beam modification of preparations of the albuminous nature for improvement of their pharmacological properties. Meditsina i obrazovanie v Sibiri = Medicine and Education in Siberia. 2013;(4).83. [In Russian].Dusinska M., Tulinska J., El Yamani N., Kuricova M., Liskova A., Rollerova E., Rundén-Pran E., Smolkova B. Immunotoxicity, genotoxicity and epigenetic toxicity of nanomaterials: new strategies for toxicity testing? Food Chem. Toxicol. 2017;109(Pt1):797– 811. doi: 10.1016/j.fct.2017.08.030Dusinska M., Tulinska J., El Yamani N., Kuricova M., Liskova A., Rollerova E., Rundén-Pran E., Smolkova B. Immunotoxicity, genotoxicity and epigenetic toxicity of nanomaterials: new strategies for toxicity testing? Food Chem. Toxicol. 2017;109(Pt1):797– 811. doi: 10.1016/j.fct.2017.08.030Артамонов А.В., Афтанас Л.И., Бекарев А.А., Дыгай А.М., Жданов В.В., Зюзьков Г.Н., Удут Е.В. Средство, обладающее регенеративной активностью. Пат. РФ № 2480236. Опубл. 27.04.2013.Artamonov A.V., Aftanas L.I., Bekarev A.A., Dygai A.M., Zhdanov V.V., Zyuzkov G.N., Udut E.V. A remedy with regenerative activit. Patent RF N 2480236; published 27.04.2013. [In Russian].Макаров В.Г., Макарова М.Н. Новое в науке и практике доклинических исследований. Сообщение 2. Лаб. живот. для науч. исслед. 2020;(3):3–6. doi: 10.29296/2618723X-2020-03-01Makarov V.G., Makarova M.N. New in science and practice of preclinical research. Report 2. Laboratornyye zhivotnyye dlya nauchnykh issledovaniy = Laboratory Animals for Science. 2020;(3):3–6. [In Russian]. doi.org/10.29296/2618723X-2020-03-01Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М.: Ремедиум; 2000. 398 с.Guidelines for the experimental (preclinical) study of new pharmacological substances. Moscow: Remedium, 2000. 398 p. [In Russian].Cunningham A.I. A method of increased sensitivity for detecting single antibody-forming cells. Nature. 1965;207:1106–1107. doi: 10.1038/2071106a0Cunningham A.I. A method of increased sensitivity for detecting single antibody-forming cells. Nature. 1965;207:1106–1107. doi: 10.1038/2071106a0Амброзиус Х., Фибих Х., Вихнер З. Иммунологические методы. М.: Медицина, 1987. 472 с.Ambrosius Kh., Fibich Kh., Wikhner Z. Immunological methods. Moscow: Meditsina, 1987. 472 p. [In Russian].Scudiero D.A., Shoemaker R.H., Paull K.D., Monks A., Tierney S., Nofziger T.N., Currens M.J., Seniff D., Boyd M.R. Evaluation of a soluble tetrazolium/formazan assay for cell growth and drug sensitivity in culture using human and other tumor cell lines. Cancer Res. 1988;48(17):4827–4833Scudiero D.A., Shoemaker R.H., Paull K.D., Monks A., Tierney S., Nofziger T.N., Currens M.J., Seniff D., Boyd M.R. Evaluation of a soluble tetrazolium/formazan assay for cell growth and drug sensitivity in culture using human and other tumor cell lines. Cancer Res. 1988;48(17):4827–4833.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.